证实去甲斑蝥素（NCTD）具抗肾间质纤维化的作用，其抗肾间质纤维化的机制与靶向抑制蛋白磷酸酶2Ac（PP2Ac）对Smad3中间连接区（Smad3-L）的去磷酸化修饰有关。

常规培养人肾小管上皮细胞（HK-2），转染PP2Ac shRNA质粒后，细胞分为5组：（1）空白组；（2）TGF-β1（5 μg/L）组；（3）TGF-β1+NCTD（2.5 mg/L）组；（4）TGF-β1+PP2Ac shRNA组；（5）TGF-β1+PP2Ac shRNA+NCTD组。采用实时荧光定量PCR和Western印迹检测PP2Ac、纤维连接蛋白（FN）、胶原蛋白I（Col-I）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和E-钙黏蛋白（E-cadherin) mRNA及蛋白的表达。然后将HK-2细胞随机分为3组：（1）空白组；（2）TGF-β1组；（3）TGF-β1+NCTD组，采用免疫荧光检测pSmad3-L（Ser²⁰⁴）和pSmad3-L（Ser²⁰⁸）在HK-2细胞的分布，Western印迹检测HK-2细胞核蛋白pSmad3-L（Ser²⁰⁴）和pSmad3-L（Ser²⁰⁸）的表达。

（1）TGF-β1促进HK-2细胞PP2Ac表达，同时上调FN、Col-I和α-SMA的表达，下调E-cadherin的表达。NCTD和PP2Ac shRNA均抑制PP2Ac的表达，下调FN、Col-I和α-SMA表达，上调E-cadherin的表达。但NCTD与小干扰RNA共同作用对PP2Ac表达的抑制，以及对TGF-β1诱导的上述指标的改变程度同单纯PP2Ac小干扰RNA干预组无明显差异。（2）TGF-β1刺激HK-2细胞核内pSmad3-L（Ser²⁰⁴）、pSmad3-L（Ser²⁰⁸）表达明显增多，NCTD干预使pSmad3-L（Ser²⁰⁴）、pSmad3-L（Ser²⁰⁸）在细胞核内表达进一步增多。

NCTD通过抑制PP2Ac介导的Smad3-L区去磷酸化，发挥抗肾间质纤维化作用。