中国明对虾线粒体MnSOD在大肠杆菌中的重组表达、产物纯化及活性测定

来源 :高技术通讯 | 被引量 : 0次 | 上传用户：chenglin229

【摘要】

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采用PCR方法扩增编码中国明对虾线粒体锰超氧化物歧化酶（MnSOD）成熟肽的基因，并克隆到大肠杆菌表达载体pCR^R T7／NTTOPO^R TA中进行体外重组表达。重组质粒转化大肠杆菌B121（DE3）pL

【作者】

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张庆利李富花黄冰心周茜相建海

【机构】

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中国科学院研究生院,中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室

【出处】

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高技术通讯

【发表日期】

：

2008年8期

【关键词】

：

中国明对虾锰超氧化物歧化酶重组表达纯化活性分析 fenneropenaeus chinensis MnSOD recombinant express

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采用PCR方法扩增编码中国明对虾线粒体锰超氧化物歧化酶（MnSOD）成熟肽的基因，并克隆到大肠杆菌表达载体pCR^R T7／NTTOPO^R TA中进行体外重组表达。重组质粒转化大肠杆菌B121（DE3）pLysS后，经IPTG诱导表达产生包涵体形式的目的蛋白。对重组蛋白进行LC-ESI-MS分析的结果表明，融合蛋白的三个肽段与中国明对虾线粒体MnSOD相应肽段完全一致。将重组蛋白通过金属螯合柱进行纯化，进而透析、复性，最后获得了活性高达2373U／mg的重组蛋白。中国明对虾线粒体MnSOD的成功表达，为

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