siRNA沉默长链非编码RNACCAT2对多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226、U266细胞的体外杀伤作用

来源 :华中科技大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:ary015
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目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默长链非编码RNA肠癌相关转录子2(CCAT2)表达对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI 8226、U266的体外杀伤作用。方法选取对数生长期RPMI 8226、U266细胞经脂质体法转染2条靶向沉默CCAT2的siRNA(siCCAT2-1、siCCAT2-2),实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测基因水平上沉默CCAT2最好的siRNA用于后续实验(实验组),同时设立阴性对照组(转染无意义序列)和空白对照组(未转染)。采用细胞计数试剂盒-8检测各组细胞增殖的抑制率,流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测各组的凋亡率,qPCR法检测各组凋亡相关基因的mRNA水平,Transwell法检测各组侵袭转移细胞数目。结果 siCCAT2-1、siCCAT2-2转染后多发性骨髓瘤细胞株中的CCAT2水平均降低,与空白对照组和阴性对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);且RPMI 8226、U266细胞中siCCAT2-2转染抑制率高于siCCAT2-1(均P<0.05),故选取siCCAT2-2来验证细胞学功能。实验组RPMI 8226、U266细胞的增殖抑制率均高于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05),且总体上抑制效果呈时间依赖的趋势;与其余两组相比,实验组RPMI 8226细胞的凋亡率及Bax、Bad的mRNA水平升高,Bcl-2水平及Transwell穿膜细胞数降低,差异有统计学意义(均P<0.05)。空白对照组和阴性对照组以上指标的差异无统计学意义(均P>0.05)。结论在多发性骨髓瘤细胞株中,siRNA靶向沉默CCAT2表达可抑制其增殖、侵袭转移并诱导凋亡,可能在多发性骨髓瘤防治中有一定价值。
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