原发性胆汁性肝硬化动物模型外周血自然杀伤性T淋巴细胞及相关细胞因子表达分析

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目的 了解聚肌苷酸胞苷酸(polyI:C)在C57BL/6小鼠中建立的原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)动物模型外周血T淋巴细胞表型.方法 20只雌性8周龄C57BL/6小鼠随机分为模型组和对照组,polyI:C 5 ms/kg腹腔注射模型组小鼠,对照组小鼠注射等体积无菌PBS,每周注射2次,16周后处死,然后进行肝组织苏木精-伊红(H.E)染色,间接免疫荧光法测定血清抗线粒体抗体(AMA),生化分析仪测定血清碱性磷酸酶(ALP)水平;流式细胞仪分析2组小鼠的外周血CD4+CD8+T淋巴细胞及自然杀伤性T淋巴细胞(NKT)所占比例;ELISA法测定血清IL-4和γ干扰素(IFN-γ)含量.结果 polyI:C注射16周后建立了符合PBC实验室诊断指标的动物模型:汇管区炎性浸润、血清AMA阳性、血清ALP水平升高;模型组小鼠外周血CD4+T淋巴细胞比例为(25.45±1.12)%,对照组为(26.72±0.63)%,差异无统计学意义(t=0.314,P>0.05),模型组小鼠外周血CD8+T淋巴细胞比例为(18.3±0.91)%,对照组为(17.8±0.58)%,差异无统计学意义(t=0.226,P>0.05);而模型组小鼠外周血NKT淋巴细胞比例为(11.56±5.09)%,对照组为(1.26 ±0.53)%,模型组高于对照组(t=9.504,P<0.01),同时模型组小鼠血清IL-4含量为(22.19±2.31)ps/ml,对照组为(8.72±0.87)ps/ml,差异有统计学意义(t=58.06,P<0.01),模型组小鼠血清IFN-γ的含量为(3.34±0.76)ns/ml,对照组为(1.14±0.21)ng/ml,差异有统计学意义(t=23.31,P<0.01).结论 polyI:C诱导的PBC动物模型外周血NKT淋巴细胞比例显著增加,同时细胞因子IL-4及IFN-γ含量显著升高;NKT淋巴细胞可能在PBC模型及PBC的发病中发挥重要作用.
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