人FL基因高效真核表达载体的构建及其在COS—7细胞中的表达

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liongliong477

【摘要】

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目的：构建人FL真核表达载体-pIRES1neo/hFL，观察其在COS-7细胞中的表达。方法：采用RT-PCR方法自人白血病细胞系TF-1中克隆可溶型FL(Flt3-ligand)cDNA片段，测序鉴定正确后，插入真核

【作者】

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王冠军马俐君李梁裴雪涛

【机构】

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白求恩医科大学第一临床医学院血液肿瘤科,北京军事医学科学院输血研究所

【出处】

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中国免疫学杂志

【发表日期】

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2001年6期

【关键词】

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FL 真核表达载体 COS-7细胞表达活性生物学活性专职抗原递呈细胞 APC hFLEukaryotic expression vectorCOS7 ce

【基金项目】

：

国家重点基础研究发展计划(973计划)

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目的：构建人FL真核表达载体-pIRES1neo/hFL，观察其在COS-7细胞中的表达。方法：采用RT-PCR方法自人白血病细胞系TF-1中克隆可溶型FL(Flt3-ligand)cDNA片段，测序鉴定正确后，插入真核表达载体-pIRES1 neo中的EcoR I和BamHI位点，构建hFL真核表达载体-pIRES1neo/hFL。脂质体介导法将其转染COS-7细胞，72h以RT-PCR检测转染细胞中外源hFL基因的转录、ELISA法及脐血CD34+细胞增殖实验测定转染细胞上清中hFL的含量和活性。结果

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