论文部分内容阅读
目的
探究微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)对肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。
方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常肝细胞株(L02)和肝癌细胞株(HepG2和PLC)中miR-27a-3p的差异表达。细胞实验分4组:HepG2过表达细胞,miR-27a-3p过表达组(miR-27a)与阴性对照组(miR-Con);PLC敲低细胞,miR-27a-3p敲低组(miR-inhibitor-27a)与阴性对照(miR-inhibitor-Con),qPCR检测转染后各组miR-27a-3p的mRNA表达情况,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布差异。两组间均数比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)。
结果qPCR结果显示,L02、HepG2及PLC的miR-27a-3p表达水平依次升高,相对表达水平分别为1.07±0.04、4.81±0.64和11.31±0.92(P < 0.05)。MTT结果显示HepG2细胞转染miR-27a-3p过表达质粒后,细胞活性与阴性对照组相比相对减弱(P < 0.05);细胞凋亡检测结果显示miR-27a-3p过表达组凋亡率高于阴性对照组(P < 0.05);细胞周期结果显示miR-27a-3p过表达细胞组S期细胞比例明显低于阴性对照组(P < 0.05)。进一步在PLC细胞中进行miR-27a-3p敲低验证,MTT、细胞凋亡和周期实验结果与HepG2过表达细胞的结果趋势相反,差异均有统计学意义(P < 0.05)。
结论miR-27a-3p可以明显抑制肝癌细胞增殖,促进细胞凋亡及改变细胞周期的分布,可能成为肝癌治疗的潜在靶点。