【摘 要】
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目的: 克隆人白细胞介素-3(hIL-3)基因cDNA, 构建其真核表达质粒pcDNA3/hIL-3.方法: 从人外周血单个核细胞中提取IL-3mRNA, 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增IL-3基因cDNA,
【机 构】
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承德医院预防医学教研室,承德医院微生物与免疫学教研室,湖南师范大学学院分子生物学教研室
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目的: 克隆人白细胞介素-3(hIL-3)基因cDNA, 构建其真核表达质粒pcDNA3/hIL-3.方法: 从人外周血单个核细胞中提取IL-3mRNA, 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增IL-3基因cDNA, 通过T/A克隆法, 首先构建pUCm-T/hIL-3, 然后构建其真核表达型载体pcDNA3/IL-3.结果: pUCm-T/hIL-3内插入片段序列与hIL-3基因序列一致; pcDNA3/IL-3经酶切鉴定与预期结果一致.结论: 成功完成了hIL-3基因克隆和pcDNA3/IL-3真核表达质粒的构建.
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