肝癌相关抗原HAb18G的高效原核表达及其体外功能的研究

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yanguangkai
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目的:构建HAb18G的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导高效表达,进行功能、免疫原性测定。方法:采用PCR技术,从已构建的pB1uescript/HAb18G克隆载体中扩增HAb18G全长eDNA,克隆人原核表达载体pRSET-C,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,表达产物用SDS-PAGE检测,表达量用激光薄层扫描检测.纯化表达的HAb18G蛋白,并用明胶酶谱和ELISA法进行测定.结果:双酶切及DNA测序证实,载体构建正确.SDS-PAGE鉴定表明,表达产物的相对分子质量(Mr)为34600,
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