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目的膀胱癌是最常见的恶性肿瘤之一,严重危害人类健康。本研究检测膀胱癌组织及不同膀胱癌细胞系中黑色素瘤抗原-A3(melanoma-associated antigen-A3,MAGE-A3)的表达情况,探讨MAGE-A3表达水平与膀胱癌分期、分级及无进展生存期等的关系,分析MAGE-A3的表达水平对不同膀胱癌细胞系增殖的影响。方法选取2013-06-01-2016-05-31武汉市第一医院泌尿外科膀胱癌患者120例。培养膀胱癌细胞系5367、HT1376及EJ-28。实时荧光定量PCR(Real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测膀胱癌组织、癌旁组织、正常膀胱组织及膀胱癌细胞系中MAGE-A3mRNA和蛋白表达水平;免疫组化检测MAGE-A3蛋白阳性率;采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲减膀胱癌细胞系中MAGE-A3的表达水平,细胞集落形成实验检测MAGE-A3对细胞活力的影响。结果膀胱癌组织中MAGE-A3mRNA的表达水平为3.31±1.28,高于癌旁组织的1.38±0.57和正常组织的0.94±0.36,F=22.85,P<0.05;膀胱癌组织中MAGE-A3蛋白的表达水平为0.91±0.32,显著高于癌旁组织的0.22±0.07和正常组织的0.16±0.11,F=30.48,P<0.05。120例膀胱癌患者中,56例膀胱癌组织MAGE-A3蛋白表达阳性,阳性率为46.7%;MAGE-A3mRNA在5367和HT1376细胞系表达水平较高,在EJ-28细胞未检测到表达。在不同病理分期(χ2=13.718,P=0.008)、病理分级(χ2=11.345,P=0.01)和无进展生存期(χ2=4.262,P=0.039)之间,MAGE-A3表达量差异均有统计学意义;随病理分期、分级的升高和无进展生存期缩短而升高;敲减MAGE-A3后,5367和HT1376细胞增殖能力明显减弱,EJ-28增殖能力无明显变化。结论 MAGE-A3在膀胱癌组织中高表达,且与膀胱癌分期、分级、无进展生存期及肿瘤细胞增殖活力密切相关,有望成为膀胱癌免疫治疗的靶点。