脂肪间充质干细胞对神经管畸形胎鼠神经元再生的促进作用

来源 :中华实用诊断与治疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weiwei05516
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目的 建立神经管畸形胎鼠模型,观察神经管畸形胎鼠脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs)表达情况,探讨其对神经管畸形胎鼠神经元再生的促进作用.方法 45只已孕Wistar大鼠分为模型组、ADSCs组和对照组各15只,模型组和ADSCs组以100 mg/kg全反式维甲酸混悬液灌胃建立神经管畸形胎鼠模型,对照组给予等体积橄榄油灌胃.造模24 h后,ADSCs组孕鼠宫内移植2μL绿色荧光蛋白-ADSCs悬液,对照组和模型组宫内注射2 μL含绿色荧光蛋白的培养基.移植48 h后取出胚胎,观察各组胚胎形态,比较畸形率;采用HE染色观察胎鼠神经管组织形态学变化;采用TUNEL法检测各组神经管细胞凋亡率;应用体式荧光显微镜观察ADSCs在胚胎内的迁移分布情况;采用免疫荧光染色观察ADSCs在神经管畸形胚胎中向神经方向分化的情况.结果 对照组胎鼠神经管结构正常、呈连续带状,模型组可见脑膨出、无脑畸形、脊柱裂等神经管畸形胎鼠,ADSCs组神经管畸形胎鼠较模型组少;模型组胚胎畸形率(94.11%)、神经管神经元细胞凋亡率[(20.32±1.81)%]高于ADSCs组[58.54%、(8.19±1.16)%]和对照组[0、(2.15±0.72)%](P<0.05),ADSCs组高于对照组(P<0.05).对照组神经管闭合完全,模型组神经管多数未闭合,ADSCs组神经管基本闭合;对照组和模型组胚胎神经管中有少量绿色荧光蛋白阳性细胞分布,ADSCs组胚胎中绿色荧光蛋白阳性细胞分布于畸形发生部位,移植的ADSCs可表达巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白、神经丝蛋白等神经特异性标志物.结论 大鼠神经管畸形发生早期进行宫内移植ADSCs,ADSCs可向胚胎神经管发生畸形部位特异性趋化,并能分化为神经特异性蛋白,早期ADSCs移植治疗神经管畸形有一定价值.
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