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目的建立人脐动脉血管平滑肌细胞(HUASMC)原代、传代培养的最佳方法,并初步建立其永生株.方法采用人脐动脉血管中膜组织块贴壁法原代培养,比较不同培养基对原代及传代细胞增殖的影响;选择标记为新霉素(G418)的带有端粒酶催化亚基(hTERT)基因的重组质粒导入人脐动脉血管平滑肌细胞.结果经α-肌动蛋白鉴定,组织块贴壁法可获得高纯度的HUASMC.原代培养的HUASMC 1～4代细胞增殖能力强、生长旺盛,此后细胞的增殖能力逐渐降低,到第10代几乎丧失增殖力.原代培养以MCDB131为最佳培养基.hTERT转