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利用PCR从Escherichia coli JM109基因组中扩增到全长为1296bp的glgC基因编码区。通过PCR重组方法进行点突变,获得氨基酸突变的3个突变体,分别是Pr0295Ser(Va1121Ala,Metl51Ile和Val334Asp)、Gly336Asp单点突变和Pr0295Ser/Gly336 Asp(Lysl09Arg),其基因分别命名为295^+3、336和295/336^+1。将突变和未突变的基因分别克隆到pET32.a,构建重组质粒pET-glgC、pET-295^+3、pE