【摘 要】
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目的:克隆人类ZNF434基因并构建其真核表达质粒,鉴定ZNF434基因的组织表达谱.方法:实时定量PCR检测ZNF434基因在人体10种组织中的表达情况；克隆ZNF434基因的全长开放读码框区
【机 构】
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河北联合大学生命科学学院,河北唐山,063000河北联合大学附属医院,河北唐山,063000;唐山职业技术学校,河北唐山,063000;
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目的:克隆人类ZNF434基因并构建其真核表达质粒,鉴定ZNF434基因的组织表达谱.方法:实时定量PCR检测ZNF434基因在人体10种组织中的表达情况；克隆ZNF434基因的全长开放读码框区并连入真核表达载体pIRES2-EGFP,磷酸钙沉淀法转染HEK293T细胞,荧光显微镜和Western blot鉴定ZNF434蛋白的表达情况.结果:ZNF434基因在检测的人体组织中均有表达,其中骨髓和睾丸表达最高,成功克隆了ZNF434基因并构建了该基因的真核表达质粒ZNF434-pIRES2-EGFP,转染HEK293T细胞可观察到绿色荧光蛋白表达,Western blot可检测出分子量56kDa的Flag-ZNF434融合蛋白表达.结论:明确了人类ZNF434基因的组织表达谱,构建了该基因的真核表达载体,为该基因的进一步研究奠定了基础.
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