【摘 要】
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为了构建单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes，LM）ncRNA rli60基因缺失株，采用基因重叠延伸PCR （SOE-PCR）的方法成功构建具有氯霉素抗性的pKSV7-Δrli60穿梭质粒，然后电转
【机 构】
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石河子大学动物科技学院动物疾病防控兵团重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31360596、30960274)
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为了构建单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes，LM）ncRNA rli60基因缺失株，采用基因重叠延伸PCR （SOE-PCR）的方法成功构建具有氯霉素抗性的pKSV7-Δrli60穿梭质粒，然后电转化至LM-SB5感受态细胞中，在温度和氯霉素的双重选择压力下进行同源重组，通过PCR进行重组菌鉴定。结果表明：成功筛选得到遗传性稳定的LM ncRNA rli60基因缺失株，为揭示LM ncRNA rli60基因功能提供了研究材料；同时，为进一步研究其在LM致病性及环境应激中的分
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