摘要：建立了虾籽中柠檬黄、日落黄等10种合成色素及其色淀的高效液相色谱测定方法。样品以氢氧化钠-甲醇溶液提取，加入EDTA络合色淀中的铝离子。采用symmetryC18色谱柱，以甲醇-20mmol/L醋酸铵为流动相梯度洗脱，二极管阵列检测器测定，外标法定量。10种色素在0.5～20.0mg/kg范围内线性良好，相关系数均大于0.9999，加标回收率82.4%～107.9%，相对标准偏差0.445%～6.310%，检出限为0.5～1.0mg/kg。
　　关键词：虾籽；合成色素；色淀；高效液相色谱
　　中图分类号：Q657.7+2文献标识号：A文章编号：1001-4942（2014）01-0110-04
　　虾籽是一种蛋白质含量高、营养丰富的食品。优质的虾籽呈现桔黄色，但在空气中易氧化而成为褐色，部分生产商可能采用加入合成色素或其色淀的方法改善虾籽的色泽，而目前国家未批准在虾籽中使用合成色素[1]。合成色素是以煤焦油中的苯胺为原料制成的，所以又称为“煤焦油色素”或“苯胺色素”。色淀是水溶性色素沉淀在氧化铝上制备成的特殊着色剂，不溶于一般介质，通过扩散进行着色。某些产品在生产过程中没有水或水分含量很少，故需要使用色淀着色，目前还没有针对色淀进行检测的方法报道。
　　毒理学研究发现，某些合成色素有慢性毒性或致癌性[2]。色素及防腐剂等的检测方法有薄层色谱法，示波极谱法[3]，高效液相色谱法[4～9]，方波伏安法[10]。这些方法大多用于检测饮品、面粉制品等基质比较简单的食品[11～16]，而虾籽基质较复杂，使用国家标准GB/T5009.35-2003[17]方法测定其中色素，前处理步骤繁琐，且不能检测其中不溶于水的色淀。本试验建立了氢氧化钠-甲醇提取，EDTA络合铝离子，高效液相色谱同时测定虾籽中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、新红、赤藓红、诱惑红、靛蓝、亮蓝、酸性红等10种合成色素及其色淀的多组分同时测定方法，结果满意。
　　1材料与方法
　　1.1材料与试剂
　　试验材料：虾籽，购自济南七里堡农贸市场。
　　试剂：甲醇（色谱纯），美国飞世尔公司；醋酸铵（色谱纯），德国Flukar公司；盐酸（分析纯），中国国药集团化学试剂有限公司；氨水（分析纯），中国天津科密欧化学试剂有限公司；氢氧化钠（分析纯），中国国药集团化学试剂有限公司；柠檬黄、苋菜红、新红、酸性红、胭脂红、日落黄、亮蓝、赤藓红、诱惑红、靛蓝标准物质（国家标准物质），中国计量科学研究院；柠檬黄铝色淀（含量10%），河南金润食品添加剂有限公司；胭脂红铝色淀（含量20%），河南金润食品添加剂有限公司；日落黄铝色淀（含量10%），上海染料研究所有限公司；乙二胺四乙酸（分析纯），中国国药集团化学试剂有限公司。
　　1.2仪器
　　Allance2695型高效液相色谱仪配2998型二极管阵列检测器，美国Waters公司；BSA822-cw型电子天平，德国Sartorios公司；AB204-S型电子天平，瑞士MettlerToledo公司；MS3基本型旋涡混合器，德国IKA公司；SB-800DTD型超声波清洗器，中国宁波新芝生物科技股份有限公司；3-18K型冷冻离心机，德国Sigma公司；mini-Q超纯水制备器，美国Millipore公司；HGC-24型氮吹仪，上海恒奥贸易有限公司；有机相针式滤器（SCAA-104），上海安谱科学仪器有限公司。
　　1.3标准溶液的制备
　　准确称取每种色素标准样品（国家标物中心提供）25mg置于25ml容量瓶中，配制成色素浓度为1.0mg/ml标准储备液。用移液管移取适量的标准储备液用甲醇-水（5+95）依次稀释成0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0μg/ml的标准系列溶液。
　　1.4高效液相色谱条件
　　色谱柱：symmetryC18柱（25cm×4.6mm，5μm）；流速：1.0ml/min；柱温：35℃；采集波长：200～650nm；进样量：50μl。
　　流动相：A为甲醇；B为20mmol/L醋酸铵溶液。梯度洗脱程序见表1。