新型抗冻剂海藻糖对低温保存皮肤组织α-辅肌动蛋白表达的实验研究

来源 :中国修复重建外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pdahome
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目的比较海藻糖与传统低温保护剂对皮肤组织α-辅肌动蛋白(α-actinin)低温保存后表达的影响,进一步揭示海藻糖的低温抗冻机制。方法实验共进行6次,每次取自愿捐献烧伤患者整形术后所余大腿部刃厚皮片5块,根据冻存时添加保存液不同,将皮片随机分为5组,每组各1块。T/D组:添加0.5mol/L海藻糖/DMSO,完全浸没皮片;D/P组:DMSO/丙二醇;D/K组:DMSO/无血清角质细胞培养基;DMEM组:DMEM;置于-196℃液氮中储存14d后复温进行实验;对照组:刃厚皮片不作任何处理。对各组皮片进行免疫组织化学染色观察,RT-PCR方法检测皮片α-actinin基因水平,皮肤内琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)定量测定法检测皮肤活力。结果对照组、T/D组、D/P组、D/K组及DMEM组吸光度(A)值分别为27.50±7.92、18.40±5.81、13.10±5.11、11.50±4.54及5.30±2.14。对照组与T/D组比较差异无统计学意义(P>0.05),与其他组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测对照组、T/D组、D/P组、D/K组及DMEM组α-actinin基因表达A值分别为0.816±0.134、0.723±0.245、0.564±0.265、0.245±0.071及0.148±0.048。对照组与T/D、D/P组比较,差异无统计学意义(P>0.05);与D/K、DMEM组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组、T/D组、D/P组、D/K组及DMEM组SDH活性值分别为18.2±3.7、12.3±3.6、10.2±2.4、7.3±2.1及5.7±1.5。对照组与T/D组比较差异无统计学意义(P>0.05),与其他组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论海藻糖对低温保存皮肤组织α-actinin的保护作用在其抗冻机制中发挥了重要作用。
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