【摘 要】
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目的 建立GC-1小鼠精原细胞染毒模型,探讨乙草胺诱导氧化应激及生殖细胞凋亡的作用与机制.方法 CCK-8检测乙草胺对GC-1细胞生存的影响,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞毒性;
【机 构】
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江苏卫生健康职业学院临床医学院,江苏南京211800;昆山市疾病预防控制中心职放环卫科,江苏苏州215300;江苏省疾病预防控制中心职业病防治所,江苏南京210028
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目的 建立GC-1小鼠精原细胞染毒模型,探讨乙草胺诱导氧化应激及生殖细胞凋亡的作用与机制.方法 CCK-8检测乙草胺对GC-1细胞生存的影响,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞毒性;通过超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)反映细胞氧化应激水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;利用Western blot技术检测MAPK、p53、Bax、Bcl-2、Caspase 3及Caspase 9等相关蛋白的表达.结果 乙草胺处理引起GC-1细胞活力降低,IC50为4.80x10-4 mol/L;细胞毒性总体呈上升趋势(P＜0.05);SOD和GSH水平呈梯度降低(P＜0.05),而MDA水平呈剂量依赖性增加;各染毒组细胞凋亡率显著上升(P＜0.01),凋亡通路相关蛋白的表达明显上调.结论 乙草胺对GC-1细胞有明显的细胞毒作用,其可能通过氧化应激强度调节ERK-p53-Bcl-2级联反应介导凋亡通路,进而影响精原细胞的生存.
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