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目的:研究建立巢式聚合酶链反应(nPCR)检测SEN病毒D和H亚型的方法,并将其应用到流行病调查.方法:选择SENV开放读码框1(ORFⅠ)核苷酸序列设计合成特异性引物,建立检测SEN病毒D和H型感染的巢式PCR方法,对216例无偿献血者、65例甲肝患者、152例乙肝患者、79例丙肝患者和83例非甲～非戊肝患者进行了SENV感染的检测.结果:该方法特异性和灵敏度均较高,检测结果显示健康献血者、甲肝、乙肝、丙肝和非甲～非戊型肝炎患者SENVD和/或H总感染率分别为29.1%、38.5%、55.3%、54.4%、38.5%.SENV D和/或H在健康献血者中总感染率显著低于乙肝和丙肝患者(P＜0.01).甲肝、乙肝、丙肝和非甲～非戊型肝炎患者总感染率无显著性差异(P＞0.05).结论:巢式PCR方法可用于检测SENV感染.我国部分地区无偿献血和肝炎等患者中存在SENV感染,其致病性有待进一步研究.