【摘 要】
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目的:基于Taqman探针结合熔解曲线技术,建立1种简单、高效的快速检测抗高血压药物相关基因多态位点的基因分型方法,指导临床上抗高血压药物的个性化给药方式,从而有效降低不良反应发生率.方法:随机采集200例原发性高血压患者的口腔粘膜脱落细胞,通过提取口腔粘膜脱落细胞基因组DNA,设计特异性的Taqman探针和不对称扩增引物,在2个反应管中采用多色Taqman探针结合熔解曲线技术对提取的基因组DNA的5个抗高血压药物相关基因多态位点进行基因分型检测,并随机抽取不同基因型的样本进行基因测序验证.结果:Taqm
【机 构】
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新乡医学院三全学院生物化学与分子生物学教研室,新乡453000;郑州市第七人民医院,郑州450000
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目的:基于Taqman探针结合熔解曲线技术,建立1种简单、高效的快速检测抗高血压药物相关基因多态位点的基因分型方法,指导临床上抗高血压药物的个性化给药方式,从而有效降低不良反应发生率.方法:随机采集200例原发性高血压患者的口腔粘膜脱落细胞,通过提取口腔粘膜脱落细胞基因组DNA,设计特异性的Taqman探针和不对称扩增引物,在2个反应管中采用多色Taqman探针结合熔解曲线技术对提取的基因组DNA的5个抗高血压药物相关基因多态位点进行基因分型检测,并随机抽取不同基因型的样本进行基因测序验证.结果:Taqman探针结合熔解曲线技术能够对200例抽提的基因组DNA的5个抗高血压药物相关基因多态位点进行准确的分型,分型结果与基因测序结果也完全一致.结论:Taqman探针熔解曲线技术能够有效的对复杂样本类型的基因组DNA进行基因分型,是1种简单、快速、精确的检测方法,可以适用于多种突变类型的检测.
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目的:建立基于高通量测序技术的11种乌头属药材混合粉末分子鉴定方法.方法:采用高通量测序技术,对11种乌头属药材混合粉末样品中的总DNA经提取,对ITS2片段进行PCR扩增,利用IlluminaMiSeq平台对DNA片段进行双端测序,最后采用FLASH、QIIME、GraPhlAn及MEGA 6.0软件对序列进行整理并聚类分析,鉴定混合粉末中的物种.结果:混合样品中得到高质量的ITS2序列共82348条,样品中乌头属物种含有序列69814条,比对出其中的8个物种,即样品中含有草乌、川乌、阴山乌头、华北乌头
目的:建立高效逆流色谱法(HPCCC)从白益母草中分离制备4个抗氧化成分.方法:白益母草95％乙醇水提取物经D101大孔树脂柱色谱,先用水和45％乙醇水各1000 mL洗脱,然后用70％乙醇水(5000 mL)洗脱.70％乙醇水洗脱液减压回收至干,用HPCCC法以正己烷-正丁醇-水-冰醋酸(1∶2∶1∶0.1)为两相溶剂系统,在主机转速1000 r·min-1,检测波长261 nm条件下进行分离制备,得到化合物1～4,经谱学数据分析,确定其结构式.同时,利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法测定
目的:建立超高效液相色谱离子阱高分辨质谱联用(UPLC-MS/MS)法测定乙酰唑胺及其制剂中遗传毒性杂质双硫脲的含量.方法:采用NanoChrom ChromCoreTM120 C18(2.1 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为10 mmol· L-1甲酸铵溶液-甲醇(95∶5),流速0.2 mL· min-1,柱温为30℃,检测方式为正离子(ESI+)模式下平行反应监测(PRM).结果:双硫脲杂质在0.0483～0.1810μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9992),原料的平均回收率
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目的:对格列美脲中间体4-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧代-3-吡咯啉-1-甲酰胺基)乙基]-苯磺酰胺(BHXA)在相对保留时间(RRT) 1.08和1.46处的2个较大杂质进行分离、鉴别.方法:采用高效制备型高效液相色谱(Prep-HPLC)对BHXA的杂质进行分离,通过核磁(1H-NMR、13C-NMR)和质谱(MS)进行结构分析和鉴定,并进一步使用3-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧代-3-吡咯啉-1-甲酰胺基)乙基]-苯磺酰胺和2-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧代-3-吡咯啉-1-甲酰胺
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