【摘 要】
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目的:建立基于高通量测序技术的11种乌头属药材混合粉末分子鉴定方法.方法:采用高通量测序技术,对11种乌头属药材混合粉末样品中的总DNA经提取,对ITS2片段进行PCR扩增,利用IlluminaMiSeq平台对DNA片段进行双端测序,最后采用FLASH、QIIME、GraPhlAn及MEGA 6.0软件对序列进行整理并聚类分析,鉴定混合粉末中的物种.结果:混合样品中得到高质量的ITS2序列共82348条,样品中乌头属物种含有序列69814条,比对出其中的8个物种,即样品中含有草乌、川乌、阴山乌头、华北乌头
【机 构】
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内蒙古民族大学,通辽028000;辽宁中医药大学,大连116000
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目的:建立基于高通量测序技术的11种乌头属药材混合粉末分子鉴定方法.方法:采用高通量测序技术,对11种乌头属药材混合粉末样品中的总DNA经提取,对ITS2片段进行PCR扩增,利用IlluminaMiSeq平台对DNA片段进行双端测序,最后采用FLASH、QIIME、GraPhlAn及MEGA 6.0软件对序列进行整理并聚类分析,鉴定混合粉末中的物种.结果:混合样品中得到高质量的ITS2序列共82348条,样品中乌头属物种含有序列69814条,比对出其中的8个物种,即样品中含有草乌、川乌、阴山乌头、华北乌头、瓜叶乌头、毛叶乌头、花葶乌头、高乌头;未能比对出黄花乌头、松潘乌头、川鄂乌头3种乌头属药材.结论:以ITS2作为条形码,采用高通量测序技术,可以鉴定出乌头属药材混合粉末中的8个物种,为混合药材的鉴定提供新思路.
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目的:建立高效液相色谱法同时测定通窍耳聋丸中龙胆苦苷、栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、木香烃内酯、大黄酚的含量.方法:供试品以70%甲醇水回流提取1h,采用Waters Atlantis T3-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.15%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长240nm(检测龙胆苦苷和栀子苷)、278 nm(检测黄芩苷、汉黄芩苷和黄芩素)、224 nm(检测木香烃内酯和大黄酚),进样量10μL.对16批样品进行聚类分析.
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