【摘 要】
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目的 探讨重组人干细胞因子/血小板生成素(SCF TPO)融合蛋白纯化及复性的最佳方法。方法 裂解 法提取包涵体,在变性条件下利用金属螯和层析获得融合蛋白,经透析及谷胱甘
【机 构】
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军事医学科学院附属医院及国家生物医学分析中心免疫学研究室,军事医学科学院附属医院及国家生物医学分析中心免疫学研究室,军事医学科学院附属医院及国家生物医学分析中心免疫学研究室,军事医学科学院附属医院及国
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目的 探讨重组人干细胞因子/血小板生成素(SCF TPO)融合蛋白纯化及复性的最佳方法。方法 裂解 法提取包涵体,在变性条件下利用金属螯和层析获得融合蛋白,经透析及谷胱甘肽氧化还原法对纯化的融合蛋白进 行复性。结果 获得具有初步生物学活性的SCF TPO融合蛋白,其纯度高达90%。结论 该纯化方法操作简捷, 特异性高,纯化效果好,获得率高。
Objective To investigate the best method of purification and renaturation of recombinant human stem cell factor / thrombopoietin (SCF TPO) fusion protein. Inclusion bodies were extracted by the method of lysis, and the fusion proteins were obtained by metal chelation chromatography under denaturing conditions. The purified fusion proteins were refolded by dialysis and glutathione redox reaction. Results The primary biological activity of SCF TPO fusion protein was obtained with purity up to 90%. Conclusion The purification method is simple, high specificity, good purification, high yield.
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