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为建立同时检测皮毛中携带的布鲁氏菌、大肠杆菌0157、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、丹毒杆菌、铜绿假单胞杆菌6种致病菌的基因芯片检测方法，本研究根据NCBI中细菌的16SrDNA和gyrB基因序列，分别设计通用引物和特异性寡核苷酸探针。点样制备检测基因芯片，核酸杂交后，优化并建立同时检测6种致病菌的基因芯片方法。结果表明：使用47％甲酰胺杂交液，42℃摇转杂交4h为最佳杂交条件。建立的基因芯片方法在多种致病菌之间无交叉反应，检测敏感性可达10拷贝。制备的基因芯片稳定，有效保存期为6个月。该基因芯片对临