【摘 要】
：
目的 探讨利用脱氧核酶切割环氧化酶-2(COX-2)mRNA来抑制其基因表达以及对人肝癌细胞凋亡的影响.方法 合成针对COX-2基因的"10～23"型脱氧核酶及其类似物,提取人肝癌细胞总RNA在胞外切割COX-2 mRNA,检测其胞外切割活性;转染肝癌细胞,检测其在细胞内的切割活性及对细胞凋亡的影响.用RT-PCR检测COX-2和凋亡相关基因bcl-2、bax的mRNA水平,用荧光免疫方法测定相应
【机 构】
：
广东医学院附属医院肝胆外科,广东医学院附属医院中心实验室
【基金项目】
：
广东省社会发展领域科技技术项目;
论文部分内容阅读
目的 探讨利用脱氧核酶切割环氧化酶-2(COX-2)mRNA来抑制其基因表达以及对人肝癌细胞凋亡的影响.方法 合成针对COX-2基因的"10～23"型脱氧核酶及其类似物,提取人肝癌细胞总RNA在胞外切割COX-2 mRNA,检测其胞外切割活性;转染肝癌细胞,检测其在细胞内的切割活性及对细胞凋亡的影响.用RT-PCR检测COX-2和凋亡相关基因bcl-2、bax的mRNA水平,用荧光免疫方法测定相应的蛋白水平.结果 非修饰脱氧核酶DzT和修饰的脱氧核酶DzTi(在DzT的3'末端添加倒位连接的T碱基)在胞外切割反应中能够有效地切割COX-2 mRNA;在转染进入肝癌细胞后,DzTi比DzT显示更强的切割活性,显著地下调细胞内COX-2蛋白水平(P＜0.01)和bcl-2蛋白水平(P＜0.05),上调bax蛋白的表达(P＜0.01),抑制肝癌细胞的生长(P＜0.05).脱氧寡核苷酸DzT'和DzTi'是由对DzT和DzTi的催化区进行碱基替换而成,在胞外和胞内均不能切割COX-2mRNA和促进肝癌细胞的凋亡.结论 脱氧核酶能够有效切割COX-2 mRNA,抑制COX-2蛋白表达和促进肝癌细胞凋亡,有可能作为COX-2抑制剂用于医学临床.
其他文献
近年来,性激素与自身免疫性疾病的关系日益受到关注.Sjogren综合征(SS)位居自身免疫性疾病的第二位,具有显著的女性易感特征,性激素与SS的关系不容忽视,本文就此方面的研究作
目的:传递体作为双氯芬酸钠经皮渗透载体的体外研究。方法:采用改良Franz扩散池体外经皮渗透实验技术,对双氯芬酸钠传递体、普通脂质体及其凝胶剂的经皮渗透作用进行了比较。
颞下颌关节紊乱病(TMD)是口腔科临床的常见病、多发病.在口腔医学中除龋病、牙周病和错畸形三大疾病外,TMD被列为第四位[1].此病的主要症状是颞下颌关节和咀嚼肌疼痛,严重影
目的 探讨Ap-1基因RNA干扰抑制血管平滑肌细胞(VSMCs)基因对VSMCs增殖的影响.方法 以Ap-1基因RNA干扰VSMCs基因,应用MTT比色试验检测VSMCs增殖情况,流式细胞仪检测VSMCs细胞
肝星状细胞(HSC)的激活和增殖是肝纤维化的中心环节,血小板源生长因子(PDGF)为重要的促细胞活化、分裂的增殖剂.PDGF与其受体结合后通过RAS/细胞外信号调节激酶(ERK)途径、磷
21世纪是知识经济时代的世纪,生产要素和资本结构都较之以往发生了重大变化,企业的自我制约和自我调节等内部控制制度都面临着改革,企业的财务管理面临的是非常复杂纷繁的社
胎粪吸入综合征可引起多种严重的并发症,是足月新生儿发病及死亡的重要原因.缺氧,中性粒细胞的活化、聚集、黏附等多种机制与胎粪吸入引起的肺损伤有关.地塞米松,血管扩张剂
目的:研究黄芩甙对人肝癌BEL-7402细胞系黏附、细胞凋亡及细胞周期的影响,探讨三者之间的关系.方法:应用细胞培养技术培养BEL-7402细胞,不同浓度黄芩甙处理肝癌细胞,通过Boyd
随着城镇化进程的加快，我国建设市场规模进一步扩大，中央投资项目的落实，水利建设资金的大量投入，给招标代理行业带来了发展机遇和广阔前景。河南省招标投标行业现已逐步走上了法
目的对1例先天性抗凝血酶(AT)缺陷症患者及其家系成员进行 AT 表型及基因突变检测。方法采用发色底物法和免疫比浊法分别检测先证者及其家系成员血浆 AT 活性(AT:A)和AT 抗原