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摘要 [目的]探究不同组成中药合生元对蛋鸡养分消化率及蛋品质的影响。[方法]选取216只400日龄的健康海兰褐蛋鸡，随机分成3组，对照组饲喂基础日粮，试验组①饲喂基础日粮+0.5%乳酸菌-红曲霉中药合生元制剂，试验组②饲喂基础日粮+0.5%紅曲霉中药合生元，试验共56 d。[结果]与对照组相比，试验组①和②的日粮干物质、粗蛋白和钙的表观消化率显著提高（P<0.05），且试验组①和②存在显著差异（P<0.05）。与对照组和试验组②相比，试验组①鸡蛋蛋黄中蛋白质含量显著提高（P<0.05）、蛋黄中脂肪、胆固醇、甘油三酯含量显著降低（P<0.05）。与对照组相比，试验组①和②蛋黄中SOD与GSH-Px活性显著提高（P<0.05），MDA含量显著降低（P<0.05）。与对照组相比，
试验组①和②鸡蛋的失重率、蛋黄系数和蛋白pH均呈缓慢上升，且第28天试验组①鸡蛋失重率与对照组相比差异显著（P<0.05）。[结论]蛋鸡日粮中添加0.5%乳酸菌-红曲霉中药合生元制剂与0.5%红曲霉中药合生元制剂均可以提高蛋鸡养分消化率，改善鸡蛋品质，且0.5%乳酸菌-红曲霉中药合生元制剂效果更好。
关键词 乳酸菌；红曲霉；中药合生元；蛋鸡；蛋品质
中图分类号 S816.7 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2018）17-0082-04
Abstract [Objective] To explore the effects of different compositions of Chinese traditional medicine synbiotics on nutrient digestibility and egg quality of laying hens.[Method] 216 400dayold healthy Hyline brown hens were selected and randomly divided into 3 groups.The hens in control group were fed with basal diet，and those in experiment group ① were fed with the basal diet +0.5% lactic acid bacteriaMonascus purpureus Chinese medicine compound preparation synbiotics，and those in experiment group ② were fed with the basal diet +0.5% M. purpureus Chinese medicine synbiotics.The test lasted 56 days.[Result] Compared with control group，the apparent digestibility of dry matter，crude protein and calcium in experiment groups ① and ② were significantly improved （P<0.05），and there was no significant difference between experiment group ① and experiment group ②（P<0.05）.Compared with control group and experiment group ②，protein content in egg yolk in experiment group ① significantly increased （P<0.05），and the content of fat，cholesterol and triglyceride in egg yolk in experiment group ① decreased significantly （P<0.05）.Compared with control group，the activities of SOD and GSHPx in the yolk in experiment groups ① and ② significantly increased （P<0.05），and their MDA content decreased significantly （P<0.05）. Compared with control group，the weight loss rate，yolk factor and protein pH of eggs in experiment groups ① and ② increased slowly.On the 28th day，the weight loss rate of eggs in experiment group ① had significant difference with that in control group （P<0.05）.[Conclusion] Adding 0.5% lactic acid bacteriaM.purpureus Chinese medicine compound preparation synbiotics and 0.5% M.purpureus Chinese medicine synbiotics in the diet of laying hens could improve the nutrient digestion rate of laying hens and egg quality.And the feeding effect of 0.5% lactic acid bacteriaM.purpureus Chinese medicine compound preparation synbiotics was better. Key words Lactic acid bacteria；Monascus purpureus；Chinese medicine synbiotics；Laying hens；Egg quality
中草药均由天然材料组成，不会在畜禽体内残留。将中草药作为一种健康保健物质添加在禽类饲料中，可以提高畜禽产品质量，降低兽药投入，进而提高养殖经济效益[1]。红曲霉微生态制剂提高了肉鸡对日粮的采食量，红曲酶及其代谢产物通过抑制有害菌，改善肠道菌群结构，因此增重效果明显且腹脂率低；将红曲霉制剂添加在蛋鸡日粮中，可以提高产蛋率及蛋品质，促进对日粮中氮和磷的吸收，降低了排泄物对生态环境的危害，因此红曲霉是一种可生产绿色生物发酵饲料添加剂的有益菌[2-4]。乳酸菌及其代谢产物可抑制部分腐败菌的生长，促进蛋鸡肠道有益菌群的发展，刺激胃肠道消化液的分泌，同时可以提高免疫水平，降低血清胆固醇水平[5]。目前已有中药与红曲霉配伍添加、乳酸菌制剂单独添加的相关报道，均取得了很好的效果[6-9]。笔者将乳酸菌与红曲霉中药合生元混合后添加到蛋鸡饲料中，比较2种不同组成合生元制剂的作用效果，研究其对蛋鸡养分消化率和蛋品质的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 红曲霉-中药合生元制剂的制备。
将山楂、山药、红枣按比例放入锅中，与大米一同煮熟，待大米凉透后装入150 mL锥形瓶中，装入量为100 mL，用棉花塞塞好瓶口，放入高压灭菌锅中（0.1 MPa，121 ℃，30 min）中灭菌。取出后，放在超净工作台上自然晾干，冷却将至室温，接入红曲霉中药菌种。在32 ℃恒温培养箱中培养15 d后，取出转移至烘干托盘中，置于烘箱（60 ℃）中烘干，粉碎后放入保鲜袋。
1.1.2 乳酸菌制剂的制备。将玉米面与水按40∶1的比例混合后，放入高压灭菌锅（0.1 MPa，121℃，30 min）中灭菌，取出后制成培养基，冷却后接入乳酸菌，厌氧30 ℃条件下培养5 d后，取出后60 ℃烘干，粉碎（200目）备用。
1.2 试验分组与饲养管理
试验采用单因素完全随机试验设计，将216只海兰褐蛋鸡随机分成3组，每组3个重复， 每个重复24只。试验共56 d，预饲期7 d，正试期49 d。基础日粮组成与营养水平见表1。对照组饲喂基础日粮；试验组①饲喂基础日粮+0.25%乳酸菌制剂+0.25%红曲霉中药合生元制剂；试验组②饲喂基础日粮+0.5%红曲霉中药合生元制剂。试验蛋鸡进行阶梯式笼养，试验前对鸡舍进行彻底清扫与消毒；保证鸡舍空气清新、流动，降低有害气体和粉尘浓度。每天光照時间16 h，每天04：30、11：00、17：30饲喂，自由饮水与采食，定期清理鸡舍，每天捡蛋1次，每周带鸡消毒1次。
1.3 测定项目与方法
1.3.1 养分消化率的测定。采用全收粪法测定养分消化率。每组每个重复选取2只蛋鸡。1～2 d，仅供给清洁水，排空肠道；3～5 d，记录采食量和排泄量；收集粪便，将粪样65 ℃烘干至恒重，粉碎（200目）后装入保鲜袋备用。
粗蛋白含量的测定采用凯氏定氮法；粗脂肪含量的测定采用索氏提取法；钙含量的测定采用高锰酸钾法；总磷含量采用比色法测定；粗纤维含量的测定采用过滤法。
按照以下公式计算饲料干物质表观消化率和某养分的表观消化率：
饲料干物质表观消化率=（饲料干物质质量-粪干物质质量）/饲料干物质质量×100%（1）
某养分的表观消化率= （采食量×饲料中某养分含量-排粪量×粪中某养分含量）/（采食量×饲料中某养分含量）×100%（2）
1.3.2 常规蛋品质的测定。试验结束前5 d，每个重复随机取10枚鸡蛋，于4 ℃冰箱中保存。蛋黄和蛋清含水量的测定：将鸡蛋除壳后称重，将蛋清和蛋黄分离后分别称重，然后放入恒温干燥箱中50～53 ℃烘干8～12 h后，称重。蛋黄胆固醇含量的测定采用单试剂GPO-PAP法。蛋黄甘油三酯含量的测定采用TG酶法。
1.3.3 鸡蛋抗氧化性能的测定。蛋黄超氧化物歧化酶（SOD）活性采用黄嘌呤氧化酶法（羟胺法）测定；丙二醛（MDA）含量的测定采用TBA法；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性的测定采用比色法。以上试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.3.4 失重率的测定。鸡蛋贮存期间，每7 d称重1次并记录，绘制成折线图。按照以下公式计算鸡蛋失重率：失重率=（贮前质量-贮后质量）/贮前质量×100%。
1.3.5 蛋白pH的测定。将鸡蛋内容物倒入玻璃平皿中，取出蛋黄后，使用PHS/3C型号的pH计进行测定并记录，绘制成折线图。
1.3.6 蛋黄系数的测定。
打破蛋壳后，将鸡蛋倒入玻璃平皿，用精度 0.1 mm 的游标卡尺分别测量蛋黄高度和直径，按照以下公式计算蛋黄系数：蛋黄系数=蛋黄高度/蛋黄直径。
1.4 数据处理 试验数据用Excel软件整理，并使用SPSS 17.0统计软件进行单因素方差分析，并进行独立性t检验，P<0.05差异显著，结果用平均值±标准差来表示。
2 结果与分析
2.1 不同组成中药合生元对蛋鸡养分消化率的影响
由表2可知，与对照组相比，试验组①和②干物质的表观消化率分别提高13.46%（P<0.05）和10.10%（P<0.05），粗蛋白的表观消化率分别提高24.63%（P<0.05）和17.62%（P<0.05），钙的表观消化率分别提高26.3%（P<0.05）和17.27%（P<0.05）。
2.2 不同组成中药合生元对鸡蛋营养成分的影响
由表3可知，与对照组相比，试验组①、②的蛋清含水量和蛋黄含水量均低于对照组，但差异不显著（P>0.05）。与对照组和试验组②相比，试验组①蛋黄中蛋白含量分别提高了21.92%（P<0.05）和15.15%（P<0.05）；与对照组和试验组②相比，试验组①蛋黄中脂肪含量分别降低了4.47%（P<0.05）和1.07%（P<0.05）；试验组①蛋黄中胆固醇含量分别降低了11.05%（P<0.05）和5.52%（P<0.05）；与对照组和试验组②相比，试验组①蛋黄中甘油三酯含量分别降低了12.23%（P<0.05）和6.46%（P<0.05）。与对照组相比，试验组②蛋黄中胆固醇含量降低了5.23%（P<0.05），试验组②蛋黄中甘油三酯含量降低了5.41%（P<0.05）。 2.3 不同组成中药合生元对鸡蛋抗氧化性能的影响
由表4可知，试验组①和②蛋黄中SOD、GSH-Px活性及MDA 含量差异不显著 （P>0.05）。与对照组相比，试验组①、②蛋黄中SOD 活性分别提高了19.27%（P<0.05）和12.40%（P<0.05），试验组①、②蛋黄中GSH-Px活性分别提高了15.87%（P<0.05）和11.11%（P<0.05）；试验组①、②蛋黄中MDA含量分别比对照组降低了9.90%（P<0.05）和8.48%（P<0.05）。
2.4 不同组成合生元对鸡蛋失重率的影响
由图1可知，7～14 d鸡蛋的失重率均呈升高趋势；第28天，试验组①失重率比对照组降低了17.60%（P<0.05）。35～42 d，各组鸡蛋失重率无显著差异（P>0.05）。
2.5 不同组成中药合生元对鸡蛋蛋黄系数的影响
由图2可知，各组蛋黄系数在贮存7～21 d内下降较快，且鸡蛋已经开始变质。28 d时蛋黄系数的下降幅度最大，31 d对照组开始出现散黄蛋，42 d对照组鸡蛋完全腐败，试验组部分腐败。在整个过程中，各组蛋黄系数差异不显著（P>0.05）。
2.6 不同组成中药合生元对鸡蛋蛋白pH的影响
由图3可知， 0～7 d，与对照组相比，试验组①和②pH的增幅分别降低了71.11%（P<0.05）和68.89%（P<0.05）。對照组贮藏21 d，pH达到最大值（9.47），而试验组①和②在第28天分别达到最大值，第42天对照组鸡蛋腐败。
3 讨论
3.1 不同组成中药合生元对蛋鸡养分消化率的影响
乳酸菌促进蛋鸡消化道中有益菌繁殖，抑制其他有害菌生长，同时代谢产生乳酸，形成消化道酸性环境进一步激活酸性酶，提高消化系统（主要为肠道）对养分的消化吸收能力[10]。此外，红曲霉中药合生元中的红曲霉及其代谢产物中的各种酶类，能够帮助蛋鸡更好地消化；山楂等中药成分也具有开胃健脾的功效，这些都能够提高蛋鸡对日粮的利用率。蛋鸡日粮中添加这2种添加剂都可以促进各养分的消化吸收。马晓婷等[11]报道在蛋鸡产蛋后期补充饲喂乳酸菌可以提高蛋鸡对日粮中各营养物质的代谢率；陈天龙等[12]报道红曲霉中药合生元可以提高营养成分的表观消化率。以上研究结果均与该试验结果相一致。
3.2 不同组成中药合生元对蛋营养成分的影响
鸡蛋含水量过大，使营养成分流失较快，降低鸡蛋食用价值，因此含水量代表鸡蛋品质的好坏。该试验中各组饲养条件相同，自由饮用清洁水，所以各组间鸡蛋的含水量基本无差异。红曲霉中洛伐他汀与山楂可降低胆固醇[13]。3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG-CoA）作为肝脏内胆固醇合成的限速酶，可影响胆固醇的合成，洛伐他汀的结构与HMG-CoA还原酶结构相似从而达到竞争抑制作用，降低机体胆固醇水平，使胆固醇在鸡蛋中沉积量降低。同时，复合制剂中的乳酸菌与神曲、山药等中药成分，可改善胃肠道功能，促进对日粮蛋白的吸收利用，提高机体脂类代谢能力，使鸡蛋中蛋白含量增加，胆固醇和甘油三酯含量降低。蛋鸡日粮中添加0.25%乳酸菌制剂+0.25%红曲霉中药合生元和0.5%红曲霉中药合生元制剂，均可改善鸡蛋品质，乳酸菌-红曲酶中药合生元复合制剂效果更好。这与李泳宁等[14]和朱风华等[15]的研究结果基本一致。
3.3 不同组成合生元对鸡蛋抗氧化活性的影响
鸡蛋贮存期间生成的过氧化物会降低鸡蛋的营养价值，影响鸡蛋品质。低水平的丙二醛（MDA）含量表明脂质过氧化物氧化反应程度较低，强抗氧化。饲粮中添加这2种复合物均能降低蛋黄MDA含量，其机理为红曲酶、中药、乳酸菌中抗氧化物质减少了脂质自由基，从而降低了蛋黄MDA含量。SOD是能够通过歧化反应催化超氧化物转化为氧气和过氧化氢，降低过氧化物对鸡蛋造成的损害。GSH-Px作为一种重要的过氧化物分解酶，反映鸡蛋自身的抗氧化能力。饲粮中添加这2种复合制剂均能显著增强蛋黄中SOD和GSH-Px的活性，且乳酸菌-红曲霉中药合生元组合鸡蛋蛋黄中SOD的活性极显著高于对照组。其机理可能是乳酸菌及红曲霉通过产生SOD酶和谷胱甘肽而清除羟自由基和过氧化氢，提高了SOD 和 GSH-Px活性。此外，饲料添加剂中的中药成分的一些物质具有增强动物机体抗氧化活性的作用，其中山楂中的活性物质能够显著提高GSH-Px的活性，故2组蛋黄GSH-Px活性均显著提高。这与李乐等[16]和Shakibaie等[17]研究结果相一致，结果表明，乳酸菌-红曲霉中药合生元与红曲霉中药合生元均可提高鸡蛋抗氧化能力，但乳酸菌-红曲霉中药合生元组效果更好。
3.4 不同组成中药合生元对鸡蛋失重率的影响
鸡蛋在常温下保存，随着时间的延长，鸡蛋内的水分逐渐蒸发，鸡蛋的失重率也就随之增大，失重率也能反映鸡蛋品质[18]。该试验结果表明，各组鸡蛋失重率在0～14 d内缓慢上升。乳酸菌-红曲霉中药合生元组鸡蛋的失重率最低。该试验结果表明，乳酸菌-红曲霉中药合生元复合制剂与红曲霉中药合生元制剂均可降低鸡蛋失重率，但乳酸菌-红曲霉中药合生元效果更好。
3.5 不同组成中药合生元对鸡蛋蛋黄系数的影响
贮存时间与鸡蛋的蛋黄系数呈负相关，蛋黄系数能反映鸡蛋的新鲜程度[19]。贮存试验期间各组蛋黄系数无显著差异，但对照组鸡蛋腐败较快，而乳酸菌-红曲霉中药合生元组较红曲霉中药合生元组腐败速度慢。
3.6 不同组成中药合生元对鸡蛋蛋白pH的影响
蛋白pH从鸡蛋刚产出后开始发生变化，因此可以精确反映鸡蛋的新鲜程度[20]。贮存试验第7天，对照组鸡蛋已经不新鲜（蛋白pH迅速上升），而试验组中添加剂有效延长了鸡蛋的保鲜时间。这表明乳酸菌-红曲霉中药合生元和红曲霉中药合生元有提高鸡蛋新鲜度的趋势。 4 结论
蛋鸡日粮中添加0.5%乳酸菌-红曲中药合生元与0.5%红曲中药合生元均可以提高蛋鸡日粮表观消化率、鸡蛋营养价值、抗氧化活性及鸡蛋的贮藏品质，其中0.5%乳酸菌-红曲酶中药添加剂效果更好。
参考文献
[1] 张相鑫，陈进超，孙佳静.中药药渣作为畜禽饲料或饲料添加剂的研究进展[J].饲料工业，2017，38（22）：57-60.
[2] 付兴周，路志芳.红曲的生物学功能及其在家禽生产中的应用[J].家畜生态学报，2017，38（1）：70-72，84.
[3] 李姣清，刘浩通，李威娜，等.日粮中添加红曲霉对五华三黄鸡生长性能、肠道菌群及屠宰性能的影响[J].嘉应学院学报，2017，35（11）：58-61.
[4] 张喜路，刘宁，金英海，等.红曲霉合生元对蛋鸡产蛋率及蛋品质影响[J].吉林畜牧兽医，2016，37（8）：5-9.
[5] 陈博.乳酸菌的生理功能及其在畜禽养殖中的应用[J].饲料博览，2017（5）：13-16，21.
[6] 刘超.红曲霉素中药合生元对京红鸡生长性能及免疫功能的影响[D].延吉：延边大学，2015.
[7] 杨欣伟.红曲霉—中药合生元制劑发酵条件筛选及其对蛋鸡生产的影响[D].延吉：延边大学，2014.
[8] 李洪涛，于娟.饮水添加乳酸菌对初产蛋鸡蛋品质的影响[J].中国家禽，2017，39（5）：76-78.
[9] PENHA FILHO R A C，DAZ S J A，FERNANDO F S，et al.Immunomodulatory activity and control of Salmonella Enteritidis colonization in the intestinal tract of chickens by Lactobacillus based probiotic[J].Veterinary immunology & immunopathology，2015，167（1/2）：64-69.
[10] AOUDIA N，RIEU A，BRIANDET R，et al.Biofilms of Lactobacillus plantarum and Lactobacillus fermentum：Effect on stress responses，antagonistic effects on pathogen growth and immunomodulatory properties[J].Food microbiology，2016，53（Pt A）：51-59.
[11] 马晓婷，吴盈萍，程元，等.乳酸菌对蛋鸡产蛋后期营养物质消化代谢的影响[J].饲料工业，2017，38（13）：20-24.
[12] 陈天龙，耿春银，张敏.酵母菌-中药红曲霉功能性微生态制剂对蛋鸡生产性能及表观消化率的影响[J].饲料研究，2015（14）：37-40.
[13] AFFUSO F，RUVOLO A，MICILLO F，et al.Effects of a nutraceutical combination （berberrine，red yeast rice and policosanols） on lipid levels and endothelial function randomized，doubleblind，placebocontrolled study[J].Nutrition，metabolism and cardiovascular diseases，2010，20（9）：656-661.
[14] 李泳宁，朱宏阳，吴焜，等.一种富含红曲色素微生物发酵饲料在蛋鸡养殖中的应用[J].粮食与饲料工业，2015（2）：52-54.
[15] 朱风华，陈甫，徐进栋，等.乳酸菌发酵饲料对蛋鸡生产性能及蛋品质的影响[J].饲料研究，2015（6）：48-52.
[16] 李乐，张敏，耿春银，等.不同添加量的富硒乳酸菌对蛋鸡免疫和抗氧化性能的影响[J].中国饲料，2017（19）：21-24.
[17] SHAKIBAIE M，MOHAMMADIKHORSAND T，ADELISARDOU M，et al.Probiotic and antioxidant properties of seleniumenriched Lactobacillus brevis LSe isolated from an Iranian traditional dairy product[J].Journal of trace elements in medicine & biology organ，2017，40：1-9.
[18] 薛艳蓉，茂文，赵瑞生，等.鸡蛋在储存过程中微生物及蛋品质的变化研究[J].畜牧与饲料科学，2017，38（8）：67-69，72.
[19] 于滨，王喜波.贮藏条件与禽蛋品质的相关性研究[J].食品科技，2012，37（6）：64-68.
[20] 张玉华，侯成杰，孟一，等.鸡蛋物流过程中品质变化规律研究[J].食品科技，2011，36（8）：50-53.
试验组①和②鸡蛋的失重率、蛋黄系数和蛋白pH均呈缓慢上升，且第28天试验组①鸡蛋失重率与对照组相比差异显著（P<0.05）。[结论]蛋鸡日粮中添加0.5%乳酸菌-红曲霉中药合生元制剂与0.5%红曲霉中药合生元制剂均可以提高蛋鸡养分消化率，改善鸡蛋品质，且0.5%乳酸菌-红曲霉中药合生元制剂效果更好。
关键词 乳酸菌；红曲霉；中药合生元；蛋鸡；蛋品质
中图分类号 S816.7 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2018）17-0082-04
Abstract [Objective] To explore the effects of different compositions of Chinese traditional medicine synbiotics on nutrient digestibility and egg quality of laying hens.[Method] 216 400dayold healthy Hyline brown hens were selected and randomly divided into 3 groups.The hens in control group were fed with basal diet，and those in experiment group ① were fed with the basal diet +0.5% lactic acid bacteriaMonascus purpureus Chinese medicine compound preparation synbiotics，and those in experiment group ② were fed with the basal diet +0.5% M. purpureus Chinese medicine synbiotics.The test lasted 56 days.[Result] Compared with control group，the apparent digestibility of dry matter，crude protein and calcium in experiment groups ① and ② were significantly improved （P<0.05），and there was no significant difference between experiment group ① and experiment group ②（P<0.05）.Compared with control group and experiment group ②，protein content in egg yolk in experiment group ① significantly increased （P<0.05），and the content of fat，cholesterol and triglyceride in egg yolk in experiment group ① decreased significantly （P<0.05）.Compared with control group，the activities of SOD and GSHPx in the yolk in experiment groups ① and ② significantly increased （P<0.05），and their MDA content decreased significantly （P<0.05）. Compared with control group，the weight loss rate，yolk factor and protein pH of eggs in experiment groups ① and ② increased slowly.On the 28th day，the weight loss rate of eggs in experiment group ① had significant difference with that in control group （P<0.05）.[Conclusion] Adding 0.5% lactic acid bacteriaM.purpureus Chinese medicine compound preparation synbiotics and 0.5% M.purpureus Chinese medicine synbiotics in the diet of laying hens could improve the nutrient digestion rate of laying hens and egg quality.And the feeding effect of 0.5% lactic acid bacteriaM.purpureus Chinese medicine compound preparation synbiotics was better. Key words Lactic acid bacteria；Monascus purpureus；Chinese medicine synbiotics；Laying hens；Egg quality
中草药均由天然材料组成，不会在畜禽体内残留。将中草药作为一种健康保健物质添加在禽类饲料中，可以提高畜禽产品质量，降低兽药投入，进而提高养殖经济效益[1]。红曲霉微生态制剂提高了肉鸡对日粮的采食量，红曲酶及其代谢产物通过抑制有害菌，改善肠道菌群结构，因此增重效果明显且腹脂率低；将红曲霉制剂添加在蛋鸡日粮中，可以提高产蛋率及蛋品质，促进对日粮中氮和磷的吸收，降低了排泄物对生态环境的危害，因此红曲霉是一种可生产绿色生物发酵饲料添加剂的有益菌[2-4]。乳酸菌及其代谢产物可抑制部分腐败菌的生长，促进蛋鸡肠道有益菌群的发展，刺激胃肠道消化液的分泌，同时可以提高免疫水平，降低血清胆固醇水平[5]。目前已有中药与红曲霉配伍添加、乳酸菌制剂单独添加的相关报道，均取得了很好的效果[6-9]。笔者将乳酸菌与红曲霉中药合生元混合后添加到蛋鸡饲料中，比较2种不同组成合生元制剂的作用效果，研究其对蛋鸡养分消化率和蛋品质的影响。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 红曲霉-中药合生元制剂的制备。
将山楂、山药、红枣按比例放入锅中，与大米一同煮熟，待大米凉透后装入150 mL锥形瓶中，装入量为100 mL，用棉花塞塞好瓶口，放入高压灭菌锅中（0.1 MPa，121 ℃，30 min）中灭菌。取出后，放在超净工作台上自然晾干，冷却将至室温，接入红曲霉中药菌种。在32 ℃恒温培养箱中培养15 d后，取出转移至烘干托盘中，置于烘箱（60 ℃）中烘干，粉碎后放入保鲜袋。
1.1.2 乳酸菌制剂的制备。将玉米面与水按40∶1的比例混合后，放入高压灭菌锅（0.1 MPa，121℃，30 min）中灭菌，取出后制成培养基，冷却后接入乳酸菌，厌氧30 ℃条件下培养5 d后，取出后60 ℃烘干，粉碎（200目）备用。
1.2 试验分组与饲养管理
试验采用单因素完全随机试验设计，将216只海兰褐蛋鸡随机分成3组，每组3个重复， 每个重复24只。试验共56 d，预饲期7 d，正试期49 d。基础日粮组成与营养水平见表1。对照组饲喂基础日粮；试验组①饲喂基础日粮+0.25%乳酸菌制剂+0.25%红曲霉中药合生元制剂；试验组②饲喂基础日粮+0.5%红曲霉中药合生元制剂。试验蛋鸡进行阶梯式笼养，试验前对鸡舍进行彻底清扫与消毒；保证鸡舍空气清新、流动，降低有害气体和粉尘浓度。每天光照時间16 h，每天04：30、11：00、17：30饲喂，自由饮水与采食，定期清理鸡舍，每天捡蛋1次，每周带鸡消毒1次。
1.3 测定项目与方法
1.3.1 养分消化率的测定。采用全收粪法测定养分消化率。每组每个重复选取2只蛋鸡。1～2 d，仅供给清洁水，排空肠道；3～5 d，记录采食量和排泄量；收集粪便，将粪样65 ℃烘干至恒重，粉碎（200目）后装入保鲜袋备用。
粗蛋白含量的测定采用凯氏定氮法；粗脂肪含量的测定采用索氏提取法；钙含量的测定采用高锰酸钾法；总磷含量采用比色法测定；粗纤维含量的测定采用过滤法。
按照以下公式计算饲料干物质表观消化率和某养分的表观消化率：
饲料干物质表观消化率=（饲料干物质质量-粪干物质质量）/饲料干物质质量×100%（1）
某养分的表观消化率= （采食量×饲料中某养分含量-排粪量×粪中某养分含量）/（采食量×饲料中某养分含量）×100%（2）
1.3.2 常规蛋品质的测定。试验结束前5 d，每个重复随机取10枚鸡蛋，于4 ℃冰箱中保存。蛋黄和蛋清含水量的测定：将鸡蛋除壳后称重，将蛋清和蛋黄分离后分别称重，然后放入恒温干燥箱中50～53 ℃烘干8～12 h后，称重。蛋黄胆固醇含量的测定采用单试剂GPO-PAP法。蛋黄甘油三酯含量的测定采用TG酶法。
1.3.3 鸡蛋抗氧化性能的测定。蛋黄超氧化物歧化酶（SOD）活性采用黄嘌呤氧化酶法（羟胺法）测定；丙二醛（MDA）含量的测定采用TBA法；谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性的测定采用比色法。以上试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.3.4 失重率的测定。鸡蛋贮存期间，每7 d称重1次并记录，绘制成折线图。按照以下公式计算鸡蛋失重率：失重率=（贮前质量-贮后质量）/贮前质量×100%。
1.3.5 蛋白pH的测定。将鸡蛋内容物倒入玻璃平皿中，取出蛋黄后，使用PHS/3C型号的pH计进行测定并记录，绘制成折线图。
1.3.6 蛋黄系数的测定。
打破蛋壳后，将鸡蛋倒入玻璃平皿，用精度 0.1 mm 的游标卡尺分别测量蛋黄高度和直径，按照以下公式计算蛋黄系数：蛋黄系数=蛋黄高度/蛋黄直径。
1.4 数据处理 试验数据用Excel软件整理，并使用SPSS 17.0统计软件进行单因素方差分析，并进行独立性t检验，P<0.05差异显著，结果用平均值±标准差来表示。
2 结果与分析
2.1 不同组成中药合生元对蛋鸡养分消化率的影响
由表2可知，与对照组相比，试验组①和②干物质的表观消化率分别提高13.46%（P<0.05）和10.10%（P<0.05），粗蛋白的表观消化率分别提高24.63%（P<0.05）和17.62%（P<0.05），钙的表观消化率分别提高26.3%（P<0.05）和17.27%（P<0.05）。
2.2 不同组成中药合生元对鸡蛋营养成分的影响
由表3可知，与对照组相比，试验组①、②的蛋清含水量和蛋黄含水量均低于对照组，但差异不显著（P>0.05）。与对照组和试验组②相比，试验组①蛋黄中蛋白含量分别提高了21.92%（P<0.05）和15.15%（P<0.05）；与对照组和试验组②相比，试验组①蛋黄中脂肪含量分别降低了4.47%（P<0.05）和1.07%（P<0.05）；试验组①蛋黄中胆固醇含量分别降低了11.05%（P<0.05）和5.52%（P<0.05）；与对照组和试验组②相比，试验组①蛋黄中甘油三酯含量分别降低了12.23%（P<0.05）和6.46%（P<0.05）。与对照组相比，试验组②蛋黄中胆固醇含量降低了5.23%（P<0.05），试验组②蛋黄中甘油三酯含量降低了5.41%（P<0.05）。 2.3 不同组成中药合生元对鸡蛋抗氧化性能的影响
由表4可知，试验组①和②蛋黄中SOD、GSH-Px活性及MDA 含量差异不显著 （P>0.05）。与对照组相比，试验组①、②蛋黄中SOD 活性分别提高了19.27%（P<0.05）和12.40%（P<0.05），试验组①、②蛋黄中GSH-Px活性分别提高了15.87%（P<0.05）和11.11%（P<0.05）；试验组①、②蛋黄中MDA含量分别比对照组降低了9.90%（P<0.05）和8.48%（P<0.05）。
2.4 不同组成合生元对鸡蛋失重率的影响
由图1可知，7～14 d鸡蛋的失重率均呈升高趋势；第28天，试验组①失重率比对照组降低了17.60%（P<0.05）。35～42 d，各组鸡蛋失重率无显著差异（P>0.05）。
2.5 不同组成中药合生元对鸡蛋蛋黄系数的影响
由图2可知，各组蛋黄系数在贮存7～21 d内下降较快，且鸡蛋已经开始变质。28 d时蛋黄系数的下降幅度最大，31 d对照组开始出现散黄蛋，42 d对照组鸡蛋完全腐败，试验组部分腐败。在整个过程中，各组蛋黄系数差异不显著（P>0.05）。
2.6 不同组成中药合生元对鸡蛋蛋白pH的影响
由图3可知， 0～7 d，与对照组相比，试验组①和②pH的增幅分别降低了71.11%（P<0.05）和68.89%（P<0.05）。對照组贮藏21 d，pH达到最大值（9.47），而试验组①和②在第28天分别达到最大值，第42天对照组鸡蛋腐败。
3 讨论
3.1 不同组成中药合生元对蛋鸡养分消化率的影响
乳酸菌促进蛋鸡消化道中有益菌繁殖，抑制其他有害菌生长，同时代谢产生乳酸，形成消化道酸性环境进一步激活酸性酶，提高消化系统（主要为肠道）对养分的消化吸收能力[10]。此外，红曲霉中药合生元中的红曲霉及其代谢产物中的各种酶类，能够帮助蛋鸡更好地消化；山楂等中药成分也具有开胃健脾的功效，这些都能够提高蛋鸡对日粮的利用率。蛋鸡日粮中添加这2种添加剂都可以促进各养分的消化吸收。马晓婷等[11]报道在蛋鸡产蛋后期补充饲喂乳酸菌可以提高蛋鸡对日粮中各营养物质的代谢率；陈天龙等[12]报道红曲霉中药合生元可以提高营养成分的表观消化率。以上研究结果均与该试验结果相一致。
3.2 不同组成中药合生元对蛋营养成分的影响
鸡蛋含水量过大，使营养成分流失较快，降低鸡蛋食用价值，因此含水量代表鸡蛋品质的好坏。该试验中各组饲养条件相同，自由饮用清洁水，所以各组间鸡蛋的含水量基本无差异。红曲霉中洛伐他汀与山楂可降低胆固醇[13]。3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG-CoA）作为肝脏内胆固醇合成的限速酶，可影响胆固醇的合成，洛伐他汀的结构与HMG-CoA还原酶结构相似从而达到竞争抑制作用，降低机体胆固醇水平，使胆固醇在鸡蛋中沉积量降低。同时，复合制剂中的乳酸菌与神曲、山药等中药成分，可改善胃肠道功能，促进对日粮蛋白的吸收利用，提高机体脂类代谢能力，使鸡蛋中蛋白含量增加，胆固醇和甘油三酯含量降低。蛋鸡日粮中添加0.25%乳酸菌制剂+0.25%红曲霉中药合生元和0.5%红曲霉中药合生元制剂，均可改善鸡蛋品质，乳酸菌-红曲酶中药合生元复合制剂效果更好。这与李泳宁等[14]和朱风华等[15]的研究结果基本一致。
3.3 不同组成合生元对鸡蛋抗氧化活性的影响
鸡蛋贮存期间生成的过氧化物会降低鸡蛋的营养价值，影响鸡蛋品质。低水平的丙二醛（MDA）含量表明脂质过氧化物氧化反应程度较低，强抗氧化。饲粮中添加这2种复合物均能降低蛋黄MDA含量，其机理为红曲酶、中药、乳酸菌中抗氧化物质减少了脂质自由基，从而降低了蛋黄MDA含量。SOD是能够通过歧化反应催化超氧化物转化为氧气和过氧化氢，降低过氧化物对鸡蛋造成的损害。GSH-Px作为一种重要的过氧化物分解酶，反映鸡蛋自身的抗氧化能力。饲粮中添加这2种复合制剂均能显著增强蛋黄中SOD和GSH-Px的活性，且乳酸菌-红曲霉中药合生元组合鸡蛋蛋黄中SOD的活性极显著高于对照组。其机理可能是乳酸菌及红曲霉通过产生SOD酶和谷胱甘肽而清除羟自由基和过氧化氢，提高了SOD 和 GSH-Px活性。此外，饲料添加剂中的中药成分的一些物质具有增强动物机体抗氧化活性的作用，其中山楂中的活性物质能够显著提高GSH-Px的活性，故2组蛋黄GSH-Px活性均显著提高。这与李乐等[16]和Shakibaie等[17]研究结果相一致，结果表明，乳酸菌-红曲霉中药合生元与红曲霉中药合生元均可提高鸡蛋抗氧化能力，但乳酸菌-红曲霉中药合生元组效果更好。
3.4 不同组成中药合生元对鸡蛋失重率的影响
鸡蛋在常温下保存，随着时间的延长，鸡蛋内的水分逐渐蒸发，鸡蛋的失重率也就随之增大，失重率也能反映鸡蛋品质[18]。该试验结果表明，各组鸡蛋失重率在0～14 d内缓慢上升。乳酸菌-红曲霉中药合生元组鸡蛋的失重率最低。该试验结果表明，乳酸菌-红曲霉中药合生元复合制剂与红曲霉中药合生元制剂均可降低鸡蛋失重率，但乳酸菌-红曲霉中药合生元效果更好。
3.5 不同组成中药合生元对鸡蛋蛋黄系数的影响
贮存时间与鸡蛋的蛋黄系数呈负相关，蛋黄系数能反映鸡蛋的新鲜程度[19]。贮存试验期间各组蛋黄系数无显著差异，但对照组鸡蛋腐败较快，而乳酸菌-红曲霉中药合生元组较红曲霉中药合生元组腐败速度慢。
3.6 不同组成中药合生元对鸡蛋蛋白pH的影响
蛋白pH从鸡蛋刚产出后开始发生变化，因此可以精确反映鸡蛋的新鲜程度[20]。贮存试验第7天，对照组鸡蛋已经不新鲜（蛋白pH迅速上升），而试验组中添加剂有效延长了鸡蛋的保鲜时间。这表明乳酸菌-红曲霉中药合生元和红曲霉中药合生元有提高鸡蛋新鲜度的趋势。 4 结论
蛋鸡日粮中添加0.5%乳酸菌-红曲中药合生元与0.5%红曲中药合生元均可以提高蛋鸡日粮表观消化率、鸡蛋营养价值、抗氧化活性及鸡蛋的贮藏品质，其中0.5%乳酸菌-红曲酶中药添加剂效果更好。
参考文献
[1] 张相鑫，陈进超，孙佳静.中药药渣作为畜禽饲料或饲料添加剂的研究进展[J].饲料工业，2017，38（22）：57-60.
[2] 付兴周，路志芳.红曲的生物学功能及其在家禽生产中的应用[J].家畜生态学报，2017，38（1）：70-72，84.
[3] 李姣清，刘浩通，李威娜，等.日粮中添加红曲霉对五华三黄鸡生长性能、肠道菌群及屠宰性能的影响[J].嘉应学院学报，2017，35（11）：58-61.
[4] 张喜路，刘宁，金英海，等.红曲霉合生元对蛋鸡产蛋率及蛋品质影响[J].吉林畜牧兽医，2016，37（8）：5-9.
[5] 陈博.乳酸菌的生理功能及其在畜禽养殖中的应用[J].饲料博览，2017（5）：13-16，21.
[6] 刘超.红曲霉素中药合生元对京红鸡生长性能及免疫功能的影响[D].延吉：延边大学，2015.
[7] 杨欣伟.红曲霉—中药合生元制劑发酵条件筛选及其对蛋鸡生产的影响[D].延吉：延边大学，2014.
[8] 李洪涛，于娟.饮水添加乳酸菌对初产蛋鸡蛋品质的影响[J].中国家禽，2017，39（5）：76-78.
[9] PENHA FILHO R A C，DAZ S J A，FERNANDO F S，et al.Immunomodulatory activity and control of Salmonella Enteritidis colonization in the intestinal tract of chickens by Lactobacillus based probiotic[J].Veterinary immunology & immunopathology，2015，167（1/2）：64-69.
[10] AOUDIA N，RIEU A，BRIANDET R，et al.Biofilms of Lactobacillus plantarum and Lactobacillus fermentum：Effect on stress responses，antagonistic effects on pathogen growth and immunomodulatory properties[J].Food microbiology，2016，53（Pt A）：51-59.
[11] 马晓婷，吴盈萍，程元，等.乳酸菌对蛋鸡产蛋后期营养物质消化代谢的影响[J].饲料工业，2017，38（13）：20-24.
[12] 陈天龙，耿春银，张敏.酵母菌-中药红曲霉功能性微生态制剂对蛋鸡生产性能及表观消化率的影响[J].饲料研究，2015（14）：37-40.
[13] AFFUSO F，RUVOLO A，MICILLO F，et al.Effects of a nutraceutical combination （berberrine，red yeast rice and policosanols） on lipid levels and endothelial function randomized，doubleblind，placebocontrolled study[J].Nutrition，metabolism and cardiovascular diseases，2010，20（9）：656-661.
[14] 李泳宁，朱宏阳，吴焜，等.一种富含红曲色素微生物发酵饲料在蛋鸡养殖中的应用[J].粮食与饲料工业，2015（2）：52-54.
[15] 朱风华，陈甫，徐进栋，等.乳酸菌发酵饲料对蛋鸡生产性能及蛋品质的影响[J].饲料研究，2015（6）：48-52.
[16] 李乐，张敏，耿春银，等.不同添加量的富硒乳酸菌对蛋鸡免疫和抗氧化性能的影响[J].中国饲料，2017（19）：21-24.
[17] SHAKIBAIE M，MOHAMMADIKHORSAND T，ADELISARDOU M，et al.Probiotic and antioxidant properties of seleniumenriched Lactobacillus brevis LSe isolated from an Iranian traditional dairy product[J].Journal of trace elements in medicine & biology organ，2017，40：1-9.
[18] 薛艳蓉，茂文，赵瑞生，等.鸡蛋在储存过程中微生物及蛋品质的变化研究[J].畜牧与饲料科学，2017，38（8）：67-69，72.
[19] 于滨，王喜波.贮藏条件与禽蛋品质的相关性研究[J].食品科技，2012，37（6）：64-68.
[20] 张玉华，侯成杰，孟一，等.鸡蛋物流过程中品质变化规律研究[J].食品科技，2011，36（8）：50-53.