睾酮对体外培养小鼠精原干细胞增殖与分化的影响

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目的:探讨睾酮对体外培养小鼠精原干细胞增殖与分化的影响.方法:采用Percoll密度梯度分离及差速贴壁法纯化精原干细胞,用免疫荧光染色及流式细胞检测对小鼠精原干细胞进行鉴定.设置实验组和对照组,两组均以支持细胞作为饲养层培养精原干细胞,在实验组DMEM/F12完全培养液中添加睾酮.用酶联仪检测细胞的生长情况;用流式细胞仪对细胞生长周期进行判断;采用ICSI技术让精子细胞与卵母细胞结合,观察卵裂细胞数,体外培养3天后进行染色体形态与数量分析.结果:在添加睾酮的培养基中培养的精原干细胞,其OD值增长较快(P<0.05);精原干细胞DNA合成期(S期)的含量增多(P<0.05);精子细胞与卵子结合以后可得到二倍体配子.结论:睾酮能促进精原干细胞的体外增殖与分化.
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