Amplex Red荧光法检测组织工程瓣膜赖氨酰氧化酶活性

来源 :中国胸心血管外科临床杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:feijingzhi
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目的采用Amplexred荧光法检测组织工程心脏瓣膜(tissue engineered heart valve,TEHV)中赖氨酰氧化酶(1ysyloxidase,LOX)的活性。方法经胰蛋白酶+乙二胺四乙酸、聚乙二醇辛基苯基醚和核酸酶处理,去除猪主动脉瓣叶的细胞成分,然后在其表面种植大鼠肌成纤维细胞,构建TEHV。用高糖培养基在体外培养瓣膜27d,再用不含酚酞和血清的培养基培养24h,收集此时的培养基作为样本,用Amplexred荧光法检测样本中LOX的浓度,同时应用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR
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