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摘要：目的 比较川芎散剂在不同介质中的溶出度，探讨川芎散剂的溶出特征。方法 采用桨法，以阿魏酸为指标，利用紫外分光光度法测定川芎散剂在5种介质（水、0.1 mol/L盐酸、pH 4.5醋酸缓冲盐、pH 6.8磷酸缓冲盐、pH 7.4磷酸缓冲盐）中的溶出量，绘制溶出曲线，以相似因子法和威布尔模型评价。结果 川芎散剂在5种介质中的溶出量具有差异性。在水、0.1 mol/L盐酸、pH 4.5醋酸缓冲盐和pH 6.8磷酸缓冲盐中的溶出具有相似性且符合威布尔模型，在pH 7.4磷酸缓冲盐中的溶出则发生突变，30 min即达最大溶出量。结论 川芎散剂在酸性到中性再到碱性介质中溶出量逐渐增多且溶出时间缩短，在酸性和中性介质中溶出曲线相似，在碱性介质中溶出快而完全。
关键词：川芎；阿魏酸；溶出度；紫外分光光度法；威布尔模型
中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）02-0088-04
川芎为伞形科植物Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎，始载于《神农本草经》。其性温，味辛、微苦，具有活血行气、祛风止痛的功效，为活血化瘀常用中药[1]。川芎的有效成分为水溶性和脂溶性两部分，其化学成分研究表明，水溶性成分以阿魏酸为代表，脂溶性成分以藁本内酯为代表[2]。因此，总酚酸类尤其是阿魏酸是川芎的重要活性成分。中药最传统的入药形式是汤剂和散剂，散剂是古老的剂型之一，在中国最早的医药典籍《黄帝内经》中已有散剂的记载，散剂历代应用颇多，迄今仍是常用剂型之一[3]。川芎多以全粉入药，最典型的是2010年版《中华人民共和国药典》收载的川芎茶调散以及古方中收载的芷芎散、风热散、清香散等。川芎以散剂形式用药，其有效成分需要从药材细胞中释放出来，才能发挥药效作用。中药散剂成分突破植物细胞壁的溶出特征，目前尚未见明确的定量研究方法，所以本研究借鉴化学药品溶出的测定方法和评价手段探索川芎散剂成分从植物细胞内释放而出的体外溶出特征，以及中药散剂的药效物质基础研究方法。
1 仪器与试药
ZRS-8G智能溶出仪（天津大学无线电厂），FW177型中药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），KQ- 400KDB型高功率数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），TU-1810 APC型紫外-可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司），ML54/02型电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）。
磷酸二氢钾、盐酸、甲醇、无水碳酸钠、乙酸钠、冰醋酸（北京化工厂）均为分析纯，水为去离子水（北京中医药大学中药学院实验楼制备），福林酚试剂（Sigma，2N，F9252，50 mL），阿魏酸对照品（Aladdin，含量99%，批号F111083-5g），中药材川芎购自北京同仁堂，经北京中医药大学王晶娟副教授鉴定为伞形科植物川芎 Ligusticum Chuanxiong Hort.的干燥根茎。
2 方法与结果
2.1 散剂的制备
按照2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅠB散剂的规定制备[4]，取药材川芎1.5 kg，粉碎并过100目筛，置干燥器中备用。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的阿魏酸对照品9.0 mg置于100 mL容量瓶中，加70 mL甲醇超声处理使溶解，放冷后用甲醇定容，摇匀，作为阿魏酸对照品储备液（0.09 mg/mL）。
2.2.2 供试品溶液的制备 根据2010年版《中华人民共和国药典》（一部）中川芎含量测定方法，取0.4 g川芎细粉，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，密塞，称定质量，加热回流30 min，放冷，再次称定质量，用70%甲醇补足减失的质量，摇匀静置，取上清液，0.45 ?m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2.2.3 显色剂的制备 Folin-Ciocalteu试剂中的钨钼酸可以将多酚化合物定量氧化，自身被还原生成蓝色化合物，颜色的深浅与多酚含量呈正相关，因此可以通过该比色法对多酚进行定量分析[5]。根据GB/T8313-2008UV法[6]检测茶叶中多酚含量中显色剂的制备方法制备。①10%福林酚（Folin-Ciocalteu）试剂：将20 mL福林酚试剂转移到200 mL容量瓶中，用水定容并摇匀。②7.5%碳酸钠：称取37.5 g无水碳酸钠，加适量水溶解，转移至500 mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀。
2.2.4 测定方法 精密吸取待测溶液1 mL于10 mL带塞试管中，加5.0 mL 10%福林酚试剂，摇匀，充分反应3～8 min，加入4.0 mL碳酸钠溶液，室温下避光1 h，以显色剂加溶出介质为空白。
2.3 含量测定方法的建立
2.3.1 最大吸收波长的确定 Sington和Joseph[7]认为，不同的酚类物质与福林酚试剂显色后最大吸收波长略有差异。因此利用Folin-Ciocalteu法时应根据原料及所选用的对照品来选择最佳吸收波长。取阿魏酸对照品溶液、供试品溶液和去离子水各1 mL，按“2.2.4”项下方法进行显色，用紫外-可见分光光度计在400～900 nm波长范围内进行扫描。结果显示，对照品溶液和供试品溶液在764 nm处均有明显吸收峰，且波形相似，同时空白没有吸收，表明方法可行，选择764 nm为检测波长。
2.3.2 标准曲线的绘制 分别精密移取“2.2.1”项下阿魏酸对照品储备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 mL于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，各取1 mL对照品溶液，以去离子水代替样品溶液为空白，按“2.2.4”项下方法进行测定，以吸光度值为纵坐标，对照品溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归模型：Y=7.444 4X+0.037，r2=0.999 5，在0.018～0.063 mg/mL范围内线性良好。 2.3.3 精密度试验 取同一份供试品，按“2.2.4”项下方法测定吸光度值，连续测定6次，测定值分别为0.479、0.478、0.476、0.478、0.479、0.479，RSD=0.224%，表明该方法具有较高的精密度，能达到样品分析目的。
2.3.4 稳定性试验 取同一份供试品溶液按“2.2.4”项下方法进行测定，每隔5 min测定吸光度值，测定值依次为0.479、0.478、0.477、0.479、0.480、0.479、0.477、0.479、0.478，RSD=0.212%，表明样品显色后在45 min内，稳定性良好。
2.3.5 重复性试验 取同一批样品平行6份，精密称定，按供试品溶液制备方法制备样品溶液，按“2.2.4”项下方法进行测定，测定吸光度值，测定值分别为0.479、0.476、0.480、0.478、0.479、0.479，平均值为0.479，RSD=0.289%，表明该方法重复性良好。
2.3.6 加样回收率试验 取已知含量的供试品液6份，分别加入等量的阿魏酸对照品溶液，按“2.2.4”项下方法进行测定，计算平均加样回收率为99.5%， RSD=1.05%，表明该方法可靠性强。
2.4 溶出度的测定
2.4.1 溶出介质的配制 分别选取蒸馏水、0.1 mol/L盐酸、pH 4.5醋酸缓冲盐、pH 6.8磷酸缓冲盐、pH 7.4磷酸缓冲盐作为溶出介质，根据2010年版《中华人民共和国药典》（二部）附录进行制备。①0.1 mol/L盐酸：取9 mL盐酸于1000 mL容量瓶中定容，摇匀，即得。②醋酸缓冲盐（pH 4.5）：取醋酸钠18 g，加冰醋酸9.8 mL，加水稀释成1000 mL，摇匀，即得。③磷酸缓冲盐（pH 6.8）：取27.22 g磷酸二氢钾，加入1000 mL水，制成0.2 mol磷酸二氢钾溶液。取0.2 mol磷酸二氢钾溶液250 mL，加入0.2 mol/L氢氧化钠溶液118 mL，用水稀释至1000 mL，摇匀，即得。④磷酸缓冲盐（pH 7.4）：取磷酸二氢钾1.36 g，加0.1 mol/L氢氧化钠溶液79 mL，用水稀释至200 mL，即得。
2.4.2 供试品溶出度测定 取川芎细粉4.0 g，按照2010年版《中华人民共和国药典》（二部）附录XC第二法桨法操作，分别量取1000 mL已脱气的蒸馏水、0.1 mol/L盐酸、pH 4.5醋酸缓冲盐、pH 6.8磷酸缓冲盐、pH 7.4磷酸缓冲盐置各溶出杯内，待溶出介质温度恒定在37 ℃后，将川芎细粉投入溶出杯内，在粉末和介质接触的瞬间即刻开始计时，转速100 r/min，分别于间隔时间2、5、15、30、45、60、90、120 min取样，每次取出液体10 mL，并分别补充同等温度下的新鲜介质10 mL，取出后立即用0.45 ?m微孔滤膜过滤，取续滤液，按“2.2.4”项下方法显色，在测定波长处测定吸光度值。每种介质各做3组平行试验，取平均值。
2.5 溶出曲线的绘制与评价
2.5.1 溶出曲线的绘制 根据谢氏[8]报道的公式得到各时点校正后的累积溶出百分率。
式中，Cn为各时间点取出后的样品浓度（稀释前），L为制剂标示量（L/V2单位需与Cn一致），V1为各时间点固定取样体积，V2为溶出介质体积。
将测得值代入公式计算，结果表明川芎散剂在5种介质中呈现不同的溶出特征，总体表现为在酸性介质中溶出量较少，在碱性介质中溶出快而且完全，并且在pH 7.4磷酸缓冲液中30 min时即达最大溶出量。见表1、图1。
2.5.2 溶出曲线的评价 溶出曲线比较和评价方法有多种[9-11]，总结为2种比较方法——非模型依赖法和模型依赖法。
首先采用非模型依赖的相似因子法评价。相似因子由Moore和Flanner首先提出，并被美国食品药品管理局（FDA）推荐为比较2条溶出曲线的首选方法，具体计算公式如下：
式中，n为测试时间点数，Rt、Tt分别为对照介质，参比介质下的平均溶出度，Q为溶出度方差。f2为相似因子，从统计学上度量了2条溶出曲线之间的累积溶出度的相似性。如果50≤f2≤100，可认为2种溶出曲线相似；完全相同的2条溶出曲线，其f2=100。以水为参比，根据谢氏报道[8]选择合适的时间点进行5种溶出介质中溶出曲线f2值的计算。结果见表2。
由相似因子拟合结果可知川芎散剂在0.1 mol/L盐酸、pH 4.5醋酸缓冲盐、pH 6.8磷酸缓冲盐中溶出曲线与在水中有一定的相似性，在pH 7.4磷酸缓冲盐中溶出曲线与其他4种介质不相似，说明散剂在酸性和中性介质中溶出相似，在碱性介质中发生突变。
其次，模型依赖法能较好的拟合和提供溶出数据。本试验采用用途最广的威布尔（Weibull）分布对川芎散剂的累积溶出数据进行拟合，运用Matlab数据拟合工具箱，获取溶出度形状参数（m）及溶出85%和95%所需要的时间T85和T95。结果见表3。
由拟合度R2可知，川芎散剂在除去pH 7.4其他4种介质中溶出情况均符合威布尔分布，川芎散剂溶出85%在pH 6.8介质中仅需2.609 min，在pH 4.5中需时间最长，为64.933 min。
3 讨论
美国FDA在1999年口服固体药物生物利用度和生物等效性研究指南中首次推荐使用相似因子来评价溶出度[12]，常用于比较不同生产厂家生产的同一制剂的相似性，从而评价出各厂家产品的内在质量，本试验即是仿照此法比较川芎散剂在不同pH介质中的溶出相似性。
体内环境正常者或体质强壮者，胃肠道内存在正常量和正常pH值的胃酸和肠液；体内环境非正常者或体质虚弱者，胃酸和肠液的量及pH值有不同变化[13]。根据《化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则》，溶出介质通常采用水、0.1 mol/L盐酸溶液、缓冲液（pH值3～8为主），日本橙皮书中体外溶出度研究采用4种不同pH值（分别为1.2、4.0、6.8和水）的溶出介质来模拟消化道的体液。本试验参照以上标准采用0.1 mol/L盐酸溶液、pH 4.5醋酸缓冲盐、pH 6.8磷酸缓冲盐，除此之外还增加了pH 7.4磷酸缓冲盐的碱性介质，能更全面反映川芎口服散剂在整个消化道的溶出情况。 本试验以阿魏酸为指标测定川芎总酚酸的溶出情况。植物多酚的定量方法中较为普遍使用的有福林酚法、普鲁士蓝法、高锰酸钾法、酒石酸亚铁[14]。曾采用普鲁士蓝法，发现加入显色剂后溶液不澄清，无法进行后续测定，普鲁士蓝法主要针对含有邻二酚羟基的酚酸，不具有广泛性。根据国标茶多酚的测定选择福林酚法，结果良好，此总多酚含量的检测方法具有操作过程简单便捷、灵敏度高、稳定性好、准确可靠等优点，对川芎品质评价有促进作用。
川芎散剂在5种酸碱度介质中的溶出情况为：pH 7.4磷酸缓冲盐>pH 6.8磷酸缓冲盐>蒸馏水>0.1 mol/L盐酸>pH 4.5醋酸缓冲盐，这与酚酸显酸性在酸性条件下溶出受抑制在碱性条件下易溶出相一致。由f2因子得出散剂的溶出特征为：在酸性和中性介质中溶出相似，在碱性介质中发生突变，溶出较快而且完全。川芎口服散剂进入消化道后先到达呈酸性环境的胃中，由溶出曲线可知，30 min溶出达85%，胃排空后到达十二指肠、回肠（小肠pH 4～7），小肠是药物主要吸收部位[15]，由溶出曲线可知，在水和pH 6.8介质中90 min溶出95%以上，最后到达结肠（pH 7～8）时溶出量达100%，说明川芎散剂进入人体可全部溶出，可以不经过提取制成汤剂。本研究为川芎口服散剂的临床应用提供了依据。
参考文献：
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（收稿日期：2013-07-11，编辑：陈静）
关键词：川芎；阿魏酸；溶出度；紫外分光光度法；威布尔模型
中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）02-0088-04
川芎为伞形科植物Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎，始载于《神农本草经》。其性温，味辛、微苦，具有活血行气、祛风止痛的功效，为活血化瘀常用中药[1]。川芎的有效成分为水溶性和脂溶性两部分，其化学成分研究表明，水溶性成分以阿魏酸为代表，脂溶性成分以藁本内酯为代表[2]。因此，总酚酸类尤其是阿魏酸是川芎的重要活性成分。中药最传统的入药形式是汤剂和散剂，散剂是古老的剂型之一，在中国最早的医药典籍《黄帝内经》中已有散剂的记载，散剂历代应用颇多，迄今仍是常用剂型之一[3]。川芎多以全粉入药，最典型的是2010年版《中华人民共和国药典》收载的川芎茶调散以及古方中收载的芷芎散、风热散、清香散等。川芎以散剂形式用药，其有效成分需要从药材细胞中释放出来，才能发挥药效作用。中药散剂成分突破植物细胞壁的溶出特征，目前尚未见明确的定量研究方法，所以本研究借鉴化学药品溶出的测定方法和评价手段探索川芎散剂成分从植物细胞内释放而出的体外溶出特征，以及中药散剂的药效物质基础研究方法。
1 仪器与试药
ZRS-8G智能溶出仪（天津大学无线电厂），FW177型中药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），KQ- 400KDB型高功率数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），TU-1810 APC型紫外-可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司），ML54/02型电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）。
磷酸二氢钾、盐酸、甲醇、无水碳酸钠、乙酸钠、冰醋酸（北京化工厂）均为分析纯，水为去离子水（北京中医药大学中药学院实验楼制备），福林酚试剂（Sigma，2N，F9252，50 mL），阿魏酸对照品（Aladdin，含量99%，批号F111083-5g），中药材川芎购自北京同仁堂，经北京中医药大学王晶娟副教授鉴定为伞形科植物川芎 Ligusticum Chuanxiong Hort.的干燥根茎。
2 方法与结果
2.1 散剂的制备
按照2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅠB散剂的规定制备[4]，取药材川芎1.5 kg，粉碎并过100目筛，置干燥器中备用。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的阿魏酸对照品9.0 mg置于100 mL容量瓶中，加70 mL甲醇超声处理使溶解，放冷后用甲醇定容，摇匀，作为阿魏酸对照品储备液（0.09 mg/mL）。
2.2.2 供试品溶液的制备 根据2010年版《中华人民共和国药典》（一部）中川芎含量测定方法，取0.4 g川芎细粉，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇50 mL，密塞，称定质量，加热回流30 min，放冷，再次称定质量，用70%甲醇补足减失的质量，摇匀静置，取上清液，0.45 ?m微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2.2.3 显色剂的制备 Folin-Ciocalteu试剂中的钨钼酸可以将多酚化合物定量氧化，自身被还原生成蓝色化合物，颜色的深浅与多酚含量呈正相关，因此可以通过该比色法对多酚进行定量分析[5]。根据GB/T8313-2008UV法[6]检测茶叶中多酚含量中显色剂的制备方法制备。①10%福林酚（Folin-Ciocalteu）试剂：将20 mL福林酚试剂转移到200 mL容量瓶中，用水定容并摇匀。②7.5%碳酸钠：称取37.5 g无水碳酸钠，加适量水溶解，转移至500 mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀。
2.2.4 测定方法 精密吸取待测溶液1 mL于10 mL带塞试管中，加5.0 mL 10%福林酚试剂，摇匀，充分反应3～8 min，加入4.0 mL碳酸钠溶液，室温下避光1 h，以显色剂加溶出介质为空白。
2.3 含量测定方法的建立
2.3.1 最大吸收波长的确定 Sington和Joseph[7]认为，不同的酚类物质与福林酚试剂显色后最大吸收波长略有差异。因此利用Folin-Ciocalteu法时应根据原料及所选用的对照品来选择最佳吸收波长。取阿魏酸对照品溶液、供试品溶液和去离子水各1 mL，按“2.2.4”项下方法进行显色，用紫外-可见分光光度计在400～900 nm波长范围内进行扫描。结果显示，对照品溶液和供试品溶液在764 nm处均有明显吸收峰，且波形相似，同时空白没有吸收，表明方法可行，选择764 nm为检测波长。
2.3.2 标准曲线的绘制 分别精密移取“2.2.1”项下阿魏酸对照品储备液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 mL于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，各取1 mL对照品溶液，以去离子水代替样品溶液为空白，按“2.2.4”项下方法进行测定，以吸光度值为纵坐标，对照品溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归模型：Y=7.444 4X+0.037，r2=0.999 5，在0.018～0.063 mg/mL范围内线性良好。 2.3.3 精密度试验 取同一份供试品，按“2.2.4”项下方法测定吸光度值，连续测定6次，测定值分别为0.479、0.478、0.476、0.478、0.479、0.479，RSD=0.224%，表明该方法具有较高的精密度，能达到样品分析目的。
2.3.4 稳定性试验 取同一份供试品溶液按“2.2.4”项下方法进行测定，每隔5 min测定吸光度值，测定值依次为0.479、0.478、0.477、0.479、0.480、0.479、0.477、0.479、0.478，RSD=0.212%，表明样品显色后在45 min内，稳定性良好。
2.3.5 重复性试验 取同一批样品平行6份，精密称定，按供试品溶液制备方法制备样品溶液，按“2.2.4”项下方法进行测定，测定吸光度值，测定值分别为0.479、0.476、0.480、0.478、0.479、0.479，平均值为0.479，RSD=0.289%，表明该方法重复性良好。
2.3.6 加样回收率试验 取已知含量的供试品液6份，分别加入等量的阿魏酸对照品溶液，按“2.2.4”项下方法进行测定，计算平均加样回收率为99.5%， RSD=1.05%，表明该方法可靠性强。
2.4 溶出度的测定
2.4.1 溶出介质的配制 分别选取蒸馏水、0.1 mol/L盐酸、pH 4.5醋酸缓冲盐、pH 6.8磷酸缓冲盐、pH 7.4磷酸缓冲盐作为溶出介质，根据2010年版《中华人民共和国药典》（二部）附录进行制备。①0.1 mol/L盐酸：取9 mL盐酸于1000 mL容量瓶中定容，摇匀，即得。②醋酸缓冲盐（pH 4.5）：取醋酸钠18 g，加冰醋酸9.8 mL，加水稀释成1000 mL，摇匀，即得。③磷酸缓冲盐（pH 6.8）：取27.22 g磷酸二氢钾，加入1000 mL水，制成0.2 mol磷酸二氢钾溶液。取0.2 mol磷酸二氢钾溶液250 mL，加入0.2 mol/L氢氧化钠溶液118 mL，用水稀释至1000 mL，摇匀，即得。④磷酸缓冲盐（pH 7.4）：取磷酸二氢钾1.36 g，加0.1 mol/L氢氧化钠溶液79 mL，用水稀释至200 mL，即得。
2.4.2 供试品溶出度测定 取川芎细粉4.0 g，按照2010年版《中华人民共和国药典》（二部）附录XC第二法桨法操作，分别量取1000 mL已脱气的蒸馏水、0.1 mol/L盐酸、pH 4.5醋酸缓冲盐、pH 6.8磷酸缓冲盐、pH 7.4磷酸缓冲盐置各溶出杯内，待溶出介质温度恒定在37 ℃后，将川芎细粉投入溶出杯内，在粉末和介质接触的瞬间即刻开始计时，转速100 r/min，分别于间隔时间2、5、15、30、45、60、90、120 min取样，每次取出液体10 mL，并分别补充同等温度下的新鲜介质10 mL，取出后立即用0.45 ?m微孔滤膜过滤，取续滤液，按“2.2.4”项下方法显色，在测定波长处测定吸光度值。每种介质各做3组平行试验，取平均值。
2.5 溶出曲线的绘制与评价
2.5.1 溶出曲线的绘制 根据谢氏[8]报道的公式得到各时点校正后的累积溶出百分率。
式中，Cn为各时间点取出后的样品浓度（稀释前），L为制剂标示量（L/V2单位需与Cn一致），V1为各时间点固定取样体积，V2为溶出介质体积。
将测得值代入公式计算，结果表明川芎散剂在5种介质中呈现不同的溶出特征，总体表现为在酸性介质中溶出量较少，在碱性介质中溶出快而且完全，并且在pH 7.4磷酸缓冲液中30 min时即达最大溶出量。见表1、图1。
2.5.2 溶出曲线的评价 溶出曲线比较和评价方法有多种[9-11]，总结为2种比较方法——非模型依赖法和模型依赖法。
首先采用非模型依赖的相似因子法评价。相似因子由Moore和Flanner首先提出，并被美国食品药品管理局（FDA）推荐为比较2条溶出曲线的首选方法，具体计算公式如下：
式中，n为测试时间点数，Rt、Tt分别为对照介质，参比介质下的平均溶出度，Q为溶出度方差。f2为相似因子，从统计学上度量了2条溶出曲线之间的累积溶出度的相似性。如果50≤f2≤100，可认为2种溶出曲线相似；完全相同的2条溶出曲线，其f2=100。以水为参比，根据谢氏报道[8]选择合适的时间点进行5种溶出介质中溶出曲线f2值的计算。结果见表2。
由相似因子拟合结果可知川芎散剂在0.1 mol/L盐酸、pH 4.5醋酸缓冲盐、pH 6.8磷酸缓冲盐中溶出曲线与在水中有一定的相似性，在pH 7.4磷酸缓冲盐中溶出曲线与其他4种介质不相似，说明散剂在酸性和中性介质中溶出相似，在碱性介质中发生突变。
其次，模型依赖法能较好的拟合和提供溶出数据。本试验采用用途最广的威布尔（Weibull）分布对川芎散剂的累积溶出数据进行拟合，运用Matlab数据拟合工具箱，获取溶出度形状参数（m）及溶出85%和95%所需要的时间T85和T95。结果见表3。
由拟合度R2可知，川芎散剂在除去pH 7.4其他4种介质中溶出情况均符合威布尔分布，川芎散剂溶出85%在pH 6.8介质中仅需2.609 min，在pH 4.5中需时间最长，为64.933 min。
3 讨论
美国FDA在1999年口服固体药物生物利用度和生物等效性研究指南中首次推荐使用相似因子来评价溶出度[12]，常用于比较不同生产厂家生产的同一制剂的相似性，从而评价出各厂家产品的内在质量，本试验即是仿照此法比较川芎散剂在不同pH介质中的溶出相似性。
体内环境正常者或体质强壮者，胃肠道内存在正常量和正常pH值的胃酸和肠液；体内环境非正常者或体质虚弱者，胃酸和肠液的量及pH值有不同变化[13]。根据《化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则》，溶出介质通常采用水、0.1 mol/L盐酸溶液、缓冲液（pH值3～8为主），日本橙皮书中体外溶出度研究采用4种不同pH值（分别为1.2、4.0、6.8和水）的溶出介质来模拟消化道的体液。本试验参照以上标准采用0.1 mol/L盐酸溶液、pH 4.5醋酸缓冲盐、pH 6.8磷酸缓冲盐，除此之外还增加了pH 7.4磷酸缓冲盐的碱性介质，能更全面反映川芎口服散剂在整个消化道的溶出情况。 本试验以阿魏酸为指标测定川芎总酚酸的溶出情况。植物多酚的定量方法中较为普遍使用的有福林酚法、普鲁士蓝法、高锰酸钾法、酒石酸亚铁[14]。曾采用普鲁士蓝法，发现加入显色剂后溶液不澄清，无法进行后续测定，普鲁士蓝法主要针对含有邻二酚羟基的酚酸，不具有广泛性。根据国标茶多酚的测定选择福林酚法，结果良好，此总多酚含量的检测方法具有操作过程简单便捷、灵敏度高、稳定性好、准确可靠等优点，对川芎品质评价有促进作用。
川芎散剂在5种酸碱度介质中的溶出情况为：pH 7.4磷酸缓冲盐>pH 6.8磷酸缓冲盐>蒸馏水>0.1 mol/L盐酸>pH 4.5醋酸缓冲盐，这与酚酸显酸性在酸性条件下溶出受抑制在碱性条件下易溶出相一致。由f2因子得出散剂的溶出特征为：在酸性和中性介质中溶出相似，在碱性介质中发生突变，溶出较快而且完全。川芎口服散剂进入消化道后先到达呈酸性环境的胃中，由溶出曲线可知，30 min溶出达85%，胃排空后到达十二指肠、回肠（小肠pH 4～7），小肠是药物主要吸收部位[15]，由溶出曲线可知，在水和pH 6.8介质中90 min溶出95%以上，最后到达结肠（pH 7～8）时溶出量达100%，说明川芎散剂进入人体可全部溶出，可以不经过提取制成汤剂。本研究为川芎口服散剂的临床应用提供了依据。
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（收稿日期：2013-07-11，编辑：陈静）