【摘 要】
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中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在免疫血栓的形成过程中扮演着重要角色,然而血管内皮细胞如何介导NETs的形成,尚未完全明晰.我们利用脂多糖(LPS)或佛波酯(PMA)对稳定黏附于内皮细胞表面细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)的中性粒细胞进行4h刺激,再利用Sytox green染料标记NETs-DNA,通过荧光显微镜观察NETs形成,分析NETs-DNA的面积和荧光强度以量化NETs的形成情况.结果 显示,PMA和LPS均能诱导稳定黏附于ICAM-1上的中性粒细胞产生NETs.PMA诱导产生的NETs不
【机 构】
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华南理工大学生物科学与工程学院 广州510006;广东省人民医院广东省医学科学院医学研究部 广州510080;华南理工大学生物科学与工程学院 广州510006;广州市妇女儿童医疗中心麻醉科 广州510
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中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在免疫血栓的形成过程中扮演着重要角色,然而血管内皮细胞如何介导NETs的形成,尚未完全明晰.我们利用脂多糖(LPS)或佛波酯(PMA)对稳定黏附于内皮细胞表面细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)的中性粒细胞进行4h刺激,再利用Sytox green染料标记NETs-DNA,通过荧光显微镜观察NETs形成,分析NETs-DNA的面积和荧光强度以量化NETs的形成情况.结果 显示,PMA和LPS均能诱导稳定黏附于ICAM-1上的中性粒细胞产生NETs.PMA诱导产生的NETs不依赖于β2整合素淋巴细胞功能相关抗原-1 (LFA-1)或巨噬细胞抗原复合物-1(Mac-l).相反,LPS刺激产生NETs依赖于β2整合素中Mac-1,而不依赖LFA-1.抑制肌动蛋白丝或踝蛋白-1(Talin-1),无论是LPS或PMA刺激,NETs的形成均显著下降.本研究揭示了炎症条件下中性粒细胞与内皮细胞直接相互作用产生NETs的机制,为相关疾病的治疗和新药物的开发提供了新的理论基础.
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