【摘 要】
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目的构建Angiopoietin-2剪接体Ang2443全长及功能结构域(CC区和FL区)的原核和真核表达质粒,并在大肠杆菌内获得高产量表达.方法利用RT-PCR方法从人脐静脉内皮细胞中扩增获得A
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目的构建Angiopoietin-2剪接体Ang2443全长及功能结构域(CC区和FL区)的原核和真核表达质粒,并在大肠杆菌内获得高产量表达.方法利用RT-PCR方法从人脐静脉内皮细胞中扩增获得Ang2443功能结构域CC区和FL区,以剪接扩增PCR克隆全长片段,亚克隆至pET-32b(-)载体,IPTG诱导获得融合蛋白表达.凝血酶酶切后经柱层析纯化获得完全蛋白.结果在所培养的人脐静脉内皮细胞中,Ang2443是唯一表达的剪接体.以此构建了pET-CC、pET-FL和pET-Ang2三个原核和真核表达载体
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