【摘 要】
：
在生物转化处理工业中利用细胞表面展示技术表达脂肪酶作为一种全细胞催化形式具有很大优势,因为脂肪酶展示在细胞表面作为一种固定化酶.以超折叠绿色荧光蛋白的羧基端结构域
【机 构】
：
湖北大学生命科学学院生物资源绿色转化湖北省协同创新中心工业生物技术湖北省重点实验室
【基金项目】
：
国家自然科学基金(31100124);湖北省教育厅重点项目(D20131004)资助
论文部分内容阅读
在生物转化处理工业中利用细胞表面展示技术表达脂肪酶作为一种全细胞催化形式具有很大优势,因为脂肪酶展示在细胞表面作为一种固定化酶.以超折叠绿色荧光蛋白的羧基端结构域作为锚定区,构建变形杆菌来源的脂肪酶与羧基端结构域的融合基因.将融合基因插入到p ETsf GFP表达载体中,得到表面展示载体p ETsf GFP-Lip A.将重组质粒转入大肠杆菌Rosetta-Blue宿主菌中经自诱导后,利用免疫荧光显微技术和流式细胞仪分析确定脂肪酶成功展示于大肠杆菌细胞表面.重组酶的最高酶活达到7 009 U/g干细胞,最适反应温度和p H分别为为37℃和8.0,表面活性剂Tirton X-100、Co2+和Ni2+能显著提高脂肪酶的酶活,60%丙酮处理该酶18 h后脂肪酶残余酶活性为104%,60%乙醇处理该酶18 h后脂肪酶残余酶活性为117%,表明脂肪酶对有机试剂具有很好的耐受性.以上实验结果表明:细胞表面展示技术表达脂肪酶的最大优点为工业化应用提供了坚实的基础.
其他文献
直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤,严重威胁人类健康。现代医学诊疗技术日新月异,在直肠癌的治疗上已取得了较大的进展,无论是新的化疗方案还是外科治疗术式都得到提升,使得直肠
ue＊M＃’＃dkB4＃＃8＃”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:（100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
LW12-220型开关作为敞开式变电站常用的一次设备,对电力系统的安全稳定起着重要的作用,针对拉开银山站LW12-220型开关后,监控后台出现“压力低闭锁重合闸”信号进行了分析,介
ue＊M＃’＃dkB4＃＃8＃”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:（100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
3月26-29日,由中国轻工业联合会、中国陶瓷工业协会、湖南省商务厅以及株洲市人民政府共同主办,由醴陵市人民政府承办的中国陶瓷艺术大展暨首届湖南（醴陵）陶瓷博览会在醴陵世界
在日常习题教学中,教师往往会运用单一的“讲解—练习—辅导”教学模式,导致练习教学低效甚至无效。架设关联的桥梁,从一道基础习题入手,构建习题模块,通过这样的方式,引导学
目的:对维吾尔药矢车菊药材的质量标准初步进行了研究。方法:采用显微鉴别法对其粉末特征进行了鉴别,薄层色谱法对矢车菊中倍半萜类化合物进行了鉴别。结果:建立了矢车菊药材
ue＊M＃’＃dkB4＃＃8＃”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:（100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技