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建立了高效液相色谱法同时测定苯丙氨酸解氨酶生物催化反应中L-苯丙氨酸和反式肉桂酸含量的方法。色谱分离选用Eclipse XDB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;以1.5%乙酸和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 m L/min;检测波长为260 nm。结果表明,该方法可在23 min内实现发酵液中L-苯丙氨酸和反式肉桂酸的完全分离与定量。该方法简便、快速、结果可靠,适合对L-苯丙氨酸和反式肉桂酸的定量检测。