【摘 要】
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目的 研究过表达CagA对原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达的影响.方法 构建CagA重组腺病毒载体pAdeno-MCMV-CagA一3Flag-IRES2-EGFP(pAdeno-CagA),转染HEK293细胞,包装腺病毒,以
【机 构】
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贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室,贵州贵阳550004;贵州医科大学分子生物学重点实验室;贵州医科大学附属医院临床医学研究中心;贵州医科大学附属医院临检科
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目的 研究过表达CagA对原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达的影响.方法 构建CagA重组腺病毒载体pAdeno-MCMV-CagA一3Flag-IRES2-EGFP(pAdeno-CagA),转染HEK293细胞,包装腺病毒,以感染复数(Multiplicity of infection,MOI)50感染原代胃癌细胞72 h,并用幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)东亚株GZ7(CagA+)以MOI 50感染原代胃癌细胞24 h,通过Western blot检测CagA和已糖激酶2(HK2)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、烯醇化酶1(ENO1)、丙酮酸激酶1/2(PKM1/2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)糖酵解代谢酶的蛋白表达,采用流式细胞术检测胃癌细胞周期分布.结果 成功构建了CagA重组腺病毒载体pAdeno-CagA,用pAdeno-CagA腺病毒和Hp GZ7感染原代胃癌细胞后糖酵解代谢酶HK2、ENO1、GLUT1的表达与空载组或Hp非感染组比较均显著下调(P<0.05).与空载组比较,pAdeno-CagA感染胃癌SGC-7901细胞24、48、72 h,其G2/M期细胞百分比显著增加(P<0.05),感染72 h的空载组和CagA腺病毒组G2/M期的比值分别为16.90％和65.93％.结论 Hp通过CagA使原代胃癌细胞糖酵解代谢酶表达下调,可能与DNA损伤使细胞阻滞在G2/M期有关.
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