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根据GenBank中的参考序列设计并合成引物序列,从pMDM13h中扩增带酶切住点和His—tag的基因序列;用HindⅢ和XhoⅠ双酶切PCR扩增产物和pcDNA3.0载体,连接构建真核表达重组质粒pc3M13h,利用PCR,双酶切和测序鉴定其正确性;重组质粒pc3M13h转染COS-7细胞,瞬时表达的转染细胞(96孔板)在转染36.48h后,应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验和免疫细胞化学,分别检测pc3M13h在COS-7细胞培养上清液和细胞内的表达.结果表明,设计合成的引物成功扩增了带有酶切位点和Hi