观察Girdin基因在肝癌细胞表达及抑制其表达对癌细胞增殖、凋亡的影响。
方法Western blot检测人正常肝细胞HL-7702及肝癌Huh7、HepG2、MHCC97H、HCCLM3细胞Girdin的蛋白表达；Girdin的小干扰RNA(siRNA)通过Lipofectamine™2000转染HCCLM3细胞，并设置阴性对照组和空白对照组，收集转染48 h的细胞，Western blot检测Girdin、细胞核增殖抗原(Ki-67)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)家族含Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)家族促凋亡基因bcl-2相关X蛋白(bax)及酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路磷酸化的酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化的信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)的蛋白表达；细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染的24、48、72 h各组细胞的活力；流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡率。
结果Girdin在HepG2(0.355±0.043)、HCCLM3(0.599±0.068)、MHCC97H(0.462±0.055)、Huh7(0.378±0.049)肝癌细胞中的表达均显著高于在正常肝细胞HL-7702(0.112±0.013)的表达(PHepG2＝0.001；PHCCLM3＝0.000；PMHCC97H＝0.000；PHuh7＝0.001)；Girdin-siRNA组在24 h(0.247±0.032)、48 h(0.477±0.043)和72 h(0.666±0.073)的细胞活力均显著低于空白对照组(0.385±0.045)、(0.711±0.068)、(0.936±0.096)，在48 h的细胞凋亡率(16.18±1.38)%显著高于空白对照组(1.87±0.39)%，Ki-67(0.162±0.019)、p-JAK2(0.096±0.011)、p-STAT3(0.057±0.009)蛋白表达显著低于空白对照组(0.626±0.073)、(0.170±0.021)、(0.145±0.018)，Caspase-3(0.257±0.032)和bax(0.279±0.032)的蛋白表达显著高于空白对照组(0.120±0.013、0.135±0.015)(PKi-67＝0.000；Pp-JAK2＝0.006；Pp-STAT3＝0.002；PCaspase-3＝0.002；Pbax＝0.002)。
结论Girdin基因在肝癌细胞高表达，通过RNA干扰抑制其表达通过下调JAK2/STAT3信号降低癌细胞的增殖及诱导细胞凋亡。