豌豆ACE抑制肽对诱导损伤的EA.hy.926细胞的保护作用

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目的:实现豌豆蛋白的高值化利用。方法:以豌豆蛋白为原料,采用双酶协同酶解法制备豌豆蛋白源ACE抑制肽,以酶解时间和酶添加顺序为变量,以ACE抑制率、水解度、可溶蛋白含量为指标确定豌豆ACE抑制肽的最佳酶解工艺。将最佳酶解工艺条件下制得的ACE抑制肽进行超滤分级,探究分子量对ACE抑制活性的影响,最后通过测定ET-1、MDA含量、SOD和NO含量水平验证ACE抑制活性较高的豌豆肽对诱导损伤的EA.hy.926细胞的保护作用。结果:双酶法制备豌豆ACE抑制肽的最佳工艺条件为底物质量浓度100 mg/mL, 3.0%的碱性蛋白酶在pH 9.5、50℃条件下酶解2.0 h后加入3.0%的复合蛋白酶,在pH 7.0、50℃条件下继续酶解2.0 h。此条件下的豌豆蛋白水解物ACE抑制率的IC50值为1.141 mg/mL;小于2.5 kDa的肽组分其ACE抑制活性最强,且能显著减少Ang-Ⅱ诱导损伤细胞的ET-1、MDA含量,增加SOD和NO含量水平。结论:豌豆ACE抑制肽对Ang-Ⅱ诱导损伤EA.hy.926细胞具有保护作用。
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