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【目的】建立Ⅰ型鸭病毒性肝炎（Duck hepatitis virus,DHV）的反向遗传系统。【方法】根据Ⅰ型鸭肝炎病毒（DHV-Ⅰ）ZJ-V/2006株全基因组序列设计并合成5对特异引物,进而应用RT-PCR技术分5段扩增了DHV全基因组cDNA。将扩增的cDNA重叠片段A、B、C和DE片段分别克隆到载体pBluescriptⅡKS（＋）中,获得了DHV-ⅠZJ-V/2006株全长基因组cDNA克隆pBLDHV。在扩增5′末端时,引入ApaⅠ酶切位点和SP6启动子序列;在基因组3′末段PolyA尾引入