【摘 要】
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目的探讨上调micro RNA-206(mi R-206)和micro RNA-1(mi R-1)表达对乳腺癌干细胞增殖的影响以及其作用机制。方法采用流式细胞分选技术从乳腺癌细胞株MCF-7中分离出乳腺癌干
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所二室
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目的探讨上调micro RNA-206(mi R-206)和micro RNA-1(mi R-1)表达对乳腺癌干细胞增殖的影响以及其作用机制。方法采用流式细胞分选技术从乳腺癌细胞株MCF-7中分离出乳腺癌干细胞。实验分为空白对照组、阴性对照组、mi R-206转染组、mi R-1转染组。除空白对照组外,其他各组分别转染阴性对照mimic、hsa-mi R-206 mimic、hsa-mi R-1 mimic。应用实时定量PCR检测mi R-206、mi R-1以及转录因子EVI-1基因的表达水平;Western blot法检测EVI-1蛋白的表达;应用MTT法检测mi R-206、mi R-1对乳腺癌干细胞增殖能力的影响。结果从MCF-7细胞系中分选出CD44+/CD24-/low乳腺癌干细胞,经无血清培养后可以成功传代,用于后续试验;转染hsa-mi R-206 mimic、hsa-mi R-1 mimic 48 h后mi R-206、mi R-1相对表达水平提高,EVI-1m RNA表达水平明显下降;Western blot、MTT结果显示,上调mi R-206和mi R-1表达水平后显著降低EVI-1蛋白的表达,抑制了乳腺癌干细胞增殖能力。乳腺癌干细胞中mi R-206、mi R-1表达水平以及EVI-1蛋白表达水平的差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调mi R-206和mi R-1表达能够抑制乳腺癌干细胞增殖能力,其机制可能与下调EVI-1的表达有关。
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