17β-雌二醇对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的作用

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目的观察17β-雌二醇(E2)对大鼠骨髓来源的间充质干细胞(MSCs)成骨分化的作用,探索雌激素替代治疗绝经后骨质疏松的实验机制。方法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,利用贴壁法纯化细胞。连续传代3次后,进行成骨细胞的诱导分化,将细胞分为4个实验组,分别添加含有0.0001~0.1nmol·L-117β-E2的成骨细胞诱导分化液,同时设空白对照组。各组细胞培养第7天、14天和21天时利用放免法、酶联免疫吸附法分别测定碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(bone gla protein,BGP)以及Ⅰ型胶原含量,同时在培养21天时用茜素红染色法计数各组细胞的矿化结节数。结果与对照组相比,各实验组表达ALP活性、BGP与Ⅰ型胶原含量、形成矿化结节能力随17β-E2浓度的增加而增强,呈剂量依赖性。差异均有显著性,P<0.05。结论17β-E2能增强MSCs体外诱导成骨分化,是17β-E2在绝经后骨质疏松预防和治疗中发挥作用的实验依据。
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