【摘 要】
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目的 探讨新型化学成分明确培养基(chemically defined medium,CDM)对牙乳头细胞(dental papilla cells,DPCs)成骨分化潜能及体内牙周骨再生的影响.方法 分离大鼠DPCs,按培养
【机 构】
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口腔疾病研究国家重点实验室 国家口腔疾病临床医学研究中心 四川大学华西口腔医院 成都 610041“,”四川大学华西口腔医院 创伤与整形外科 成都 610041“,”口腔再生医学国家地方联合工程实验室
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目的 探讨新型化学成分明确培养基(chemically defined medium,CDM)对牙乳头细胞(dental papilla cells,DPCs)成骨分化潜能及体内牙周骨再生的影响.方法 分离大鼠DPCs,按培养基不同分为传统培养基(conventional medium,CM)组和CDM组,分别在CM和新型CDM中培养,评估两组DPCs细胞表面标记、增殖、迁移、成骨分化潜能;制备SD大鼠牙周骨缺损模型,CM和CDM两组DPCs分别复合胶原凝胶植入缺损区域内,评估两组DPCs在牙周骨缺损中的骨再生修复能力.结果 在CM和CDM组中,DPCs细胞均显示相似的细胞表面标记;与CM相比,CDM可促进DPCs增殖、克隆形成及细胞迁移(P<0.05);定量PCR显示CDM组DPCs成骨相关基因Runx2、Alp和Opn上调(P<0.05);碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色显示CDM组DPCs细胞ALP活性高于CM组(P<0.05);细胞经成骨诱导后,茜素红染色显示CDM组DPCs细胞成骨分化能力高于CM组(P<0.05).在大鼠体内牙周骨缺损模型中,移植CDM组DPCs细胞8周后,HE染色显示缺损区域皮质骨连续的新生骨,而CM组新生骨较少,骨皮质仍未愈合,microCT扫描定量分析显示CDM组骨体积分数(BV/TV)高于CM组(P<0.05).结论 CDM培养基可促进DPCs增殖和成骨分化能力,为未来细胞治疗中干细胞培养基的选择提供了新的方案.
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