【摘 要】
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目的：探讨钩藤总生物碱调控细胞自噬对氧化应激诱导的内皮细胞炎性反应的影响.方法：将HUVECs随机分为6组：正常对照组、oxLDL组、DMSO组、雷帕霉素(Rap)组、钩藤总生物碱组、钩藤总生物碱+3-MA组.以oxLDL诱导氧化应激并进一步诱导产生炎性反应.透射电镜和免疫荧光进行自噬形态学检测,Western blot检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、p62以及核转录因子κB(NF-κB
【机 构】
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山东中医药大学,济南250355 山东中医药大学附属医院,济南250014
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目的：探讨钩藤总生物碱调控细胞自噬对氧化应激诱导的内皮细胞炎性反应的影响.
方法：将HUVECs随机分为6组：正常对照组、oxLDL组、DMSO组、雷帕霉素(Rap)组、钩藤总生物碱组、钩藤总生物碱+3-MA组.以oxLDL诱导氧化应激并进一步诱导产生炎性反应.透射电镜和免疫荧光进行自噬形态学检测,Western blot检测LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、p62以及核转录因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)表达,ELISA法检测培养上清中细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子1(VCAM-1)含量,流式细胞技术评价细胞凋亡情况.
结果：oxLDL明显上调NF-κB、TNF-α、CRP表达和ICAM-1、VCAM-1含量(P<0.05).同时oxLDL组自暧小体增多,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1的表达显著上调,p62表达下调(P<0.05).与oxLDL组比较,钩藤总生物碱明显促进了自噬小体的产生,显著上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin-1的表达,下调p62表达(P<0.05).同时减少NF-κB、TNF-α、CRP的表达及ICAM-1、VCAM-1含量(P<0.05),减轻了细胞凋亡,3-MA在一定程度上抑制了其作用效果.
结论：钩藤总生物碱能够通过增强细胞自噬而降低氧化应激诱导的内皮细胞炎性反应,减轻细胞凋亡.
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