【摘 要】
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meq是鸡马立克病病毒(MDV)最重要的致瘤基因,在马立克病(MD)肿瘤发生中发挥关键作用。同时,它在疫苗株和强毒株之间具有明显的序列差异性。本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,
【机 构】
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河南科技大学动物科技学院,河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南省农业科学院,河南农业大学牧医工程学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(U1604232),中原千人计划-中原基础研究领军人才,河南省重点研发与推广专项(192102110072),河南省农业科学院杰出青年科技基金(2019JQ01),河南省农业科学院科研发展专项资金(2019CY012)
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meq是鸡马立克病病毒(MDV)最重要的致瘤基因,在马立克病(MD)肿瘤发生中发挥关键作用。同时,它在疫苗株和强毒株之间具有明显的序列差异性。本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以MDV疫苗株CVI988/Rispens meq基因为靶点,设计合成gRNA,克隆构建pX459-gRNA质粒,转染CEF并感染CVI988/Rispens,然后对meq基因编辑的病毒噬斑进行克隆纯化,经过PCR扩增、测序分析及IFA鉴定,成功构建1株meq基因编辑的缺失毒株CVI988Δmeq-C7,为后续筛选和鉴定抗
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