【摘 要】
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根据猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列，设计合成引物和探针，优化反应条件，建立实时定量荧光PCR方法。实验结果表明，当50pmol／L的引物0．3μL和5pmol／L的探针0．5μL时，反应体系获得的CT值较
【机 构】
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郑州牧业工程高等专科学校,河南农业大学牧医工程学院
【基金项目】
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河南省杰出人才创新基金项目(0621002100)
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根据猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列，设计合成引物和探针，优化反应条件，建立实时定量荧光PCR方法。实验结果表明，当50pmol／L的引物0．3μL和5pmol／L的探针0．5μL时，反应体系获得的CT值较小，而荧光强度增加值最大；制作的标准曲线显示各浓度范围内具有良好的线性关系；可检测到相当于20拷贝／μL的病毒DNA；与猪细小病毒、圆环病毒和猪瘟病毒等不发生交叉反应；敏感性比常规PCR电泳检测高约100倍。该方法具有快速、特异、敏感、可定量，并可同时检测大量样品等优点。
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