【摘 要】
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目的 研究二甲双胍是否影响人结肠癌SW480细胞中AMPK活性,并探讨AMPK在二甲双胍诱导自噬中的作用.方法 用不同剂量(0、1、5、10 mmol/L)二甲双胍处理SW480细胞24 h,Western b
【机 构】
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哈尔滨医科大学附属第二临床医学院普外科十病区, 哈尔滨,150000
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目的 研究二甲双胍是否影响人结肠癌SW480细胞中AMPK活性,并探讨AMPK在二甲双胍诱导自噬中的作用.方法 用不同剂量(0、1、5、10 mmol/L)二甲双胍处理SW480细胞24 h,Western blot检测AMPK、p-AMPK以及自噬相关蛋白LC3、p62蛋白表达;荧光定量PCR检测LC3 mRNA表达.二甲双胍与自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3-MA)单独或联合处理后,Western blot检测LC3、p62表达.沉默AMPK后,10 mmol/L二甲双胍处理SW480细胞24 h,Western blot检测LC3、p62蛋白表达,荧光定量PCR检测LC3mRNA表达情况.结果 不同浓度二甲双胍(1、5、10 mmol/L)处理SW480细胞后,AMPK磷酸化水平递增上升,LC3蛋白及mRNA递增表达增加,p62递减表达降低.二甲双胍与3-MA联合处理SW480细胞后,LC3表达降低,p62表达升高.3-MA有抑制二甲双胍的作用.沉默AMPK后,LC3蛋白及mRNA表达下降,p62蛋白表达增加.结论 二甲双胍可诱导SW480细胞中AMPK活化,AMPK的活化参与了二甲双胍诱导的自噬.
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