miRNA-142-3p对肺泡巨噬细胞炎症过程的负向调控及其机制

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目的探索miRNA-142-3p(miR-142-3p)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应的负向调控作用及其可能机制。方法用100ng/mL LPS诱导肺泡巨噬细胞NR8383,实时定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法分别检测诱导后0、6、24、48h时细胞中miR-142-3p和高迁移率族蛋白(HMGB1)的表达。细胞体外转染miR-142-3p拟似物(miR-142-3p mimic),qPCR检测转染后细胞中miR-142-3p及炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-1β和巨噬细胞炎症蛋白2β(MIP-2β)]的表达,蛋白质印迹法检测细胞中HMGB1的表达,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞培养液中HMGB1的含量。结果LPS诱导NR8383细胞后,细胞中miR-142-3p在48h时表达最高,HMGB1在24h时最高,与0h时相比差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-142-3p后,NR8383细胞中miR-142-3p的表达升高(P<0.05),HMGB1mRNA和蛋白及TNF-α、IL-6、IL-1β和MIP-2βmRNA的表达均降低(P<0.05)。结论 miR-142-3p能介导LPS诱导的NR8383细胞的炎症反应过程,该效应可能是通过负向调控HMGB1的表达来实现的。
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