【摘 要】
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目的 研究丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制剂对高糖培养大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMECs)的作用.方法 体外培养RMECs,将细胞分为5组:空白组、模型组、SB203580 ( p38抑
【机 构】
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福建医科大学 附属第一医院 眼科,福州,350005
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目的 研究丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制剂对高糖培养大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMECs)的作用.方法 体外培养RMECs,将细胞分为5组:空白组、模型组、SB203580 ( p38抑制剂)组、U0126 (胞外调节蛋白激酶抑制剂)组和SP600125(应激活化蛋白激酶抑制剂)组,各抑制剂组加入相应抑制剂10 μmol· L-1预孵育1 h后,除空白组外,其他4组高糖处理24 h.以免疫荧光实验检测细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)的表达分布,用实时荧光定量-聚合酶链式反应及免疫印迹法检测PPAR-γmRNA与蛋白的表达水平,流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位( MMP).结果 空白组、模型组、SB203580组、U0126组和SP600125组的PPAR-γmRNA表达量比值分别为1.00 ±0.01,0.79 ±0.06,1.01 ±0.04,1.19 ±0.11 和0.73 ±0.12;这5组MMP分别为0.40 ±0.02,0.22 ±0.01,0.41 ±0.01,0.45 ±0.01 和0.21 ±0.01.模型组与空白组比较,上述指标均显著降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05);SB203580组和U0126组与模型组比较,上述指标均升高,差异均有统计学意义(均P＜0.05);SP600125组与模型组比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05);抑制剂组中, U0126 组的上述指标升高最显著,差异均有统计学意义(均P＜0.05). PPAR-γ的蛋白水平变化与mRNA水平变化一致.结论 在高糖环境中,抑制剂U0126可上调RMECs的PPAR-γ表达并减轻其线粒体损伤.
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