【摘 要】
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目的:研究表达SIRPα-Fc融合基因的基因-溶瘤腺病毒SG655-SF对胆管癌的治疗作用.方法:将信号调节蛋白α(signal regulatory proteinα,SIRPα)突变体CV1与人IgG1 Fc段融合(简
【机 构】
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第二军医大学东方肝胆外科医院基因-病毒治疗实验室,上海,200438苏州大学医学部基础医学与生物科学学院细胞生物学系,江苏苏州,215123;
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目的:研究表达SIRPα-Fc融合基因的基因-溶瘤腺病毒SG655-SF对胆管癌的治疗作用.方法:将信号调节蛋白α(signal regulatory proteinα,SIRPα)突变体CV1与人IgG1 Fc段融合(简称SF),构建SF编码序列(基因).将SF基因插入条件增殖型腺病毒载体SG655,构建基因-溶瘤腺病毒SG655-SF.重组病毒经鉴定正确后,经扩增、滴度测定,感染293细胞.Western blot检测外源基因的表达情况.间接免疫荧光检测293细胞表达的SF蛋白对胆管癌细胞的结合能力.噻唑蓝(MTT)法测定病毒对胆管癌细胞的杀伤作用.建立人类胆管细胞癌裸鼠移植瘤模型,用SG655-SF治疗,观察疗效.取肿瘤组织进行切片检查,验证其抗肿瘤作用.结果:成功构建SF表达框、基因-溶瘤腺病毒SG655-SF.SG655-SF感染293细胞后,能高效表达SF蛋白.293细胞表达的SF蛋白能有效结合CD47高量表达的胆管癌细胞株EH-CA1-T、EH-CA1-Y.SG655-SF能有效杀伤胆管癌细胞.SG655-SF可以有效抑制肿瘤在裸鼠体内生长.肿瘤组织切片检查提示有肿瘤坏死和病毒浸润.结论:基因-溶瘤腺病毒SG655-SF具有良好的抗胆管癌活性.
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