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目的
构建蛋白质转导结构域4-铜锌超氧化物歧化酶(PTD4-Cu，Zn-SOD)原核重组表达载体。
方法利用基因重组技术，设计Cu，Zn-SOD特异性引物和PTD4寡核苷酸序列，Cu，Zn-SOD基因进行PCR反应，产物进行鉴定、回收和纯化，以pET16b为载体，经XhoⅠ和BamHⅠ双酶切反应、连接反应和质粒转化，构建pET16b-Cu，Zn-SOD原核重组表达载体，再分别将PTD4基因和pET16b-Cu，Zn-SOD载体经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切反应、连接反应和质粒转化，构建pET16b-PTD4-Cu，Zn-SOD原核重组表达载体，并进行限制性内切酶谱分析和基因测序。
结果成功构建了长度为6 207 bp的pET16b-PTD4-Cu，Zn-SOD原核重组表达载体，用NdeⅠ和BamHⅠ双酶切，得到约5.7 kb的载体片段和约510 bp的PTD4-Cu，Zn-SOD基因片段，与预期结果一致。pET16b-PTD4-Cu，Zn-SOD原核重组表达载体基因测序结果与预期的基因序列相比，碱基序列均正确。
结论成功构建了PTD4-Cu，Zn-SOD原核重组表达载体。