Pyrococcus sp.DNA聚合酶内蛋白子突变体的剪切性质

来源 :山西大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:poloya
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将含麦芽糖结合蛋白-嗜热菌DNA聚合酶内蛋白子基因的pMI84、pMI94、pMI95三个重组突变体质粒转入E.coli2426,经发酵及IPTG低温诱导表达,直链淀粉糖亲和纯化获得MI84(ser1/Ser538Stop)、MI94(Ser1→CysH1/Ser538Stop)、MI95(Ser1→A1a1/Ser538Stop)三种蛋白质前体.研究了pH、温度、巯基试剂对内蛋白子N末端的剪切影响.除MI95外,MI84、MI94前体蛋白均能发生剪切反应,DTT能明显促进MI84、MI94剪切,而且MI94剪切效果优于MI84.不同还原剂对MI94诱导差异较小,温度升高能明显加快MI94剪切反应,随着pH升高也能促进MI94剪切反应.
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