探讨matriptase基因沉默对胰腺癌细胞株SW1990侵袭力的影响。
方法采用脂质体法将不同浓度的靶向matriptase的siRNA(Ma-siRNA)转染人胰腺癌SW1990细胞株,以转染阴性对照的siRNA(NC-siRNA)作为对照组。采用荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测各组细胞matriptase mRNA和蛋白的表达水平,采用Transwell小室检测细胞侵袭能力,明胶酶谱法检测细胞matriptase及MMP-9的活性。
结果NC-siRNA组及12.5、25、50 nmol/L Ma-siRNA组SW1990细胞matriptase mRNA相对表达量分别为1.000、0.417±0.006、0.233±0.068、0.221±0.092,蛋白表达量分别为0.736±0.066、0.498±0.036、0.341±0.118、0.239±0.050,Ma-siRNA各组细胞matriptase mRNA及蛋白表达量均显著低于NC-siRNA组,差异具有统计学意义(P值均<0.01);matriptase活性分别为1.501±0.165、1.211±0.265、0.645±0.165、0.620±0.003,MMP-9活性分别为0.929±0.260、0.484±0.364、0.352±0.113、0.346±0.121,其中25、50 nmol/L Ma-siRNA组细胞的matriptase及MMP-9活性较NC-siRNA组显著下降,差异有统计学意义(P值<0.05或<0.01)。NC-siRNA组的穿膜细胞数为(256±1)个/200倍视野,25 nmol/L Ma-siRNA组为(109±3)个/200倍视野,25 nmol/L Ma-siRNA组细胞侵袭力较对照组下降(57.4±5.4)%。
结论抑制matriptase基因表达可降低胰腺癌SW1990细胞的侵袭能力,其机制可能与matriptase及MMP-9酶活性下降有关。