【摘 要】
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旨在研究丙酮酸羧化酶胞质同工酶（PC）基因在毕赤酵母中的过量表达对TCA还原途径碳源分流及草酰乙酸、L-苹果酸生产的影响,构建了表达载体pPIC3.5K-PC,并转化了毕赤酵母GS115。
【机 构】
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北京化工大学生命科学与技术学院北京生物加工过程重点实验室
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旨在研究丙酮酸羧化酶胞质同工酶（PC）基因在毕赤酵母中的过量表达对TCA还原途径碳源分流及草酰乙酸、L-苹果酸生产的影响,构建了表达载体pPIC3.5K-PC,并转化了毕赤酵母GS115。转化子经过表型鉴定,PCR分析和G418浓度梯度筛选获得了高拷贝的重组子（pas-01）。甲醇诱导表达后,经SDS-PAGE分析及PC活性检测,发现酶活提高了3倍,说明PC在毕赤酵母中获得了成功表达。以pPIC3.5K转化菌为对照,对该重组子进行了草酰乙酸及苹果酸的发酵研究。结果显示,草酰乙酸产量（177.4 mg/L）
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